酶聯免疫吸附試驗(enzyme-linked immune sorbent assay, ELISA)是Engvall和Van weemen于1971年提出的。該法是以固相載體吸附技術和免疫酶技術相結合建立的一種檢測方法，其操作簡便，無需特殊設備，并具有高度的敏感性和準確性，所以受到大家的廣泛重視，以致在較短時間內，于國內外均取得了較快的進展。

(一) 主要的技術類型 ELISA的技術類型很多，但以檢測抗體的間接法，及測定抗原的雙抗體夾心法最chang用，現將其操作流程分別簡介如下。

1. 間接法首先將已知標準抗原吸附在聚苯乙烯塑料反應板的相應孔中，然后加入被檢血清，在溫箱中作用一定時間，使形成的抗原抗體復合物均勻地附著在固相載體上，再滴加用辣根過氧化物酶(HRP)標記的抗免疫球蛋白，則與固相載體上的抗原抗體復合物的抗體結合，當加入底物溶液時，H2O2在酶的催化下氧化，同時使無色的顯色劑鄰苯二胺(OPD)脫氫氧化，形成可溶性的氧化型棕色聯苯胺，產生的顏色強度的差別，可用肉眼或特制的72型分光光度計檢測，由此推算出被檢血清中是否有相應抗體，以及含量的多少。

2. 雙抗體夾心法首先將已知抗體球蛋白吸附在載體上，致敏后，沖洗除去多余抗體，滴加被測抗原，致敏后，沖去過剩抗原，滴加酶標抗體，室溫下致敏后，沖洗除去過剩的標記抗體，加入底物溶液顯色后，再加入終止劑，以終止反應的進行，最后根據反應孔中顏色的深淺，對被檢抗原作出檢定。

(二) 在微生物檢測方面的應用   ELISA技術問世以來，已廣泛用于各種病原微生物，如病毒、細菌、真菌、支原體、立克次氏體、衣原體、螺旋體等及其抗體的檢測，在微生物檢測和疾病診斷方面發揮了重要作用，通過試劑和檢測方法的標準化，組裝的ELISA診斷試劑盒，已在臨床上得到了廣泛的應用。

(三) ELISA的特點 靈敏度高，檢測能力可達10-6mg/ml水平；應用范圍廣，既能檢測抗原又能檢測抗體，既能定性又能定量；有效期長，酶標抗體于普通冰箱中可保存一年以上，效價不下降，制成的標本，可長久保存，供隨時復查用。

［附］： 免疫酶染色法(組化法) 該法的原理與免疫熒光法相似，不同之處在于用酶標記的抗體，稱酶標抗體。酶標抗體與抗原發生特異性結合，當加入酶的底物時，底物在酶的催化下，發生組織化學反應，產生有色物質，該物質不需特殊儀器，在光學顯微鏡下即能觀察，目前常用的酶是HRP，底物為DAB，可生成棕褐色沉淀物，使玻片組織標本上的抗原所在部位呈現顏色。