酶聯(lián)免疫吸附測定法

1971年瑞典學者Engvall和Perlmann,荷蘭學者Van Weerman和Schuurs分別報道將免疫技術發(fā)展為檢測體液中微量物質(zhì)的固相免疫測定方法，即酶聯(lián)免疫吸附測定法 (Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay , ELISA) 。ELISA已成為分析化學領域中的前沿課題 ，它是一種特殊的試劑分析方法，是在免疫酶技術( immunoenzymatic techniques ) 的基礎上發(fā)展起來的一種新型的免疫測定技術 。

中文名

酶聯(lián)免疫吸附測定法

外文名

Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay , ELISA

別名

ELISA法

發(fā)現(xiàn)者

Van Weerman

原理

抗體與酶復合物結(jié)合顯色

應用于ELISA
親和素是一種糖蛋白，可由蛋清中提取。分子量60kD，每個分子由4個亞基組成，可以和4個生物素分子親密結(jié)合。維生素H，分子量244.31，存在于蛋黃中。用化學方法制成的衍生物，生物素－羥基琥珀亞胺酯（biotin-hydroxysuccinimide，BNHS）可與蛋白質(zhì)、糖類和酶等多種類型的大小分子形成生物素化的產(chǎn)物。親和素與生物素的結(jié)合，雖不屬免疫反應，但特異性強，親和力大，兩者一經(jīng)結(jié)合就極為穩(wěn)定。由于1個親和素分子有4個生物素分子的結(jié)合位置，可以連接更多的生物素化的分子，形成一種類似晶格的復合體。因此把親和素和生物素與ELISA偶聯(lián)起來，就可大提高ELISA的敏感度。