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C18的耐水性

閱讀:1485      發(fā)布時(shí)間:2022-10-12
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Dewetting孔去濕現(xiàn)象

 

      在方法開發(fā)時(shí)需要考慮的一個(gè)重要因素就是固定相的“孔去濕”。當(dāng)固定相為高疏水(如C18),且流動(dòng)相從一個(gè)高有機(jī)相組分(>40%乙腈或甲醇)變到另一個(gè)純水相或高水相組分的時(shí)候,就容易發(fā)生。這也是早期反相色譜柱常常遇到的問題。


      色譜柱在高壓條件下,流動(dòng)相中的水會(huì)被“壓入”起保留作用的固定相孔結(jié)構(gòu)里;當(dāng)泵停止后,水則不會(huì)再進(jìn)入固定相孔內(nèi)。同時(shí),由于固定相是疏水的,滯留于色譜柱中的水被從固定相孔結(jié)構(gòu)中排出。在重啟色譜泵后,即使是高壓也無法使流動(dòng)相中的水重新回到固定相孔內(nèi),從而導(dǎo)致樣品的保留時(shí)間迅速變短,分離度明顯下降。


      暫無研究表明純水/高水會(huì)導(dǎo)致碳鏈倒塌,孔去濕的主要原因填料孔表面的疏水性。發(fā)生孔去濕現(xiàn)象的色譜柱,在經(jīng)過40%以上有機(jī)溶劑長(zhǎng)時(shí)間沖洗后,是可以恢復(fù)的。


      孔去濕現(xiàn)象的發(fā)生跟填料孔徑、鍵合密度和鍵合相都有關(guān)系,除了HALO C18,HALO其他所有固定相都能在水相條件下使用,不會(huì)發(fā)生“孔去濕”現(xiàn)象。


      下方圖M演示了當(dāng)HALO C18發(fā)生“孔去濕”現(xiàn)象時(shí)色譜峰的變化。相比之下,HALO AQ-C18所具有的極性特征會(huì)保護(hù)它防止發(fā)生“孔去濕”現(xiàn)象,如圖 M 所示,泵重啟前后,HALO AQ-C18的保留和分離基本保持不變。



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