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河豚毒素檢測應(yīng)用方案
1、儀器配置
液相色譜儀、熒光檢測器、輸液泵、系統(tǒng)控制器、柱溫箱、萊博瑞特柱后衍生儀
2、色譜條件
檢測波長：波長384nm 發(fā)射波長505nm
流動(dòng)相：
A: 10mmol庚激發(fā)烷磺酸鈉+50mmol磷酸二氫鈉+50mmol磷酸氫二鈉
B: 乙腈
流速：0.4mL/min
柱溫：室溫
進(jìn)樣量：10uL
衍生試劑：萊博瑞特河豚毒素衍生試劑包
柱子：萊博瑞特C18柱
3、檢測
河豚毒素標(biāo)準(zhǔn)溶液：10ug/mL
標(biāo)準(zhǔn)溶液制備：0.03%乙酸溶液，0.45um過濾膜過濾
保留時(shí)間：14.413min
圖1河豚毒素
4、線性分析
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標(biāo)準(zhǔn)品濃度（ug/mL）
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0.25
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0.5
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1.0
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2.0
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5.0
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10.0
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峰面積（MV）
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1.95587
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4.22334
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8.01501
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16.08575
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40.12096
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76.91632
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河豚毒素是鲀魚類（俗稱河豚魚）及其它生物體內(nèi)含有的一種生物堿、為氨基全氫喹唑啉型化合物，是自然界中所發(fā)現(xiàn)的毒性最大的神經(jīng)毒素之一，曾一度被認(rèn)為是自然界中毒性最強(qiáng)的非蛋白類毒素。毒素對腸道有局部刺激作用，吸收后迅速作用于神經(jīng)末梢和神經(jīng)中樞，可高選擇性和高親和性地阻斷神經(jīng)興奮膜上鈉離子通道，阻礙神經(jīng)傳導(dǎo)，從而引起神經(jīng)麻痹而致死亡。
河豚毒素缺乏紫外、熒光和光化學(xué)特性，利用河豚毒素溶于弱酸的性質(zhì)進(jìn)行提取，在強(qiáng)堿中可產(chǎn)生具有熒光性衍生物的原理，采用柱后衍生-高效液相色譜熒光法進(jìn)行檢測。
我們?nèi)R博瑞特柱后衍生儀種類多、功能全，*具備檢測河豚毒素的要求，以下為河豚毒素試驗(yàn)譜圖：
國家標(biāo)準(zhǔn)要求貝類、魚類（不含其制品）中河豚毒素的定量限為0.25mg/kg。