熒光酪蛋白,FITC標記,關于超聲波對胰蛋白酶水解酪蛋白的影響
昊然生物分享超聲波對胰蛋白酶水解酪蛋白的影響:
文獻描述:
在超聲波頻率 20 kHz,作用與間歇時間比為1:1時,測定了不同功率下胰蛋白酶活性及該酶的z適溫度,z適 pH和米氏常數Km 的影響.結果表明,180,225 W功率下,超聲10 min的酪蛋白水解率顯著高于常規對照組(P0.05); 225 W超聲功率下,在5 ℃,10 ℃,20 ℃下水解率分別比對照組提高 4.4 倍,2.47倍和2.33倍(P0.01);超聲場下胰蛋白酶 Km 值減小,Vm 增大.將胰蛋白酶,底物分別進行超聲處理,紫外和熒光光譜分析觀察到,超聲處理后,酶溶液熒光發射光波長從334 nm移至332 nm,熒光強度提高。
酶法對食品蛋白質進行改性,是改善蛋白質的物理、化學性質,提高適口性、貯存與營養特性的技術。超聲波是頻率大于20 kHz的聲波﹐具有波動與能量的雙重屬性.當超聲強度超過一定值時,可以通過傳聲媒質相互作用,影響和改變傳聲媒質的狀態、性質及結構.超聲可使液體介質中形成微泡,其破裂及伴隨能量的釋放,可以提高許多化學反應的反應速度,改善目的產物的選擇性,引起了許多學者的關注。
實驗方法:
常規酶解:恒溫水浴箱中將酪蛋白溶液和酶溶液預熱,將酶溶液加入到酪蛋白溶液中,在設定的恒溫條件下進行酶解反應,不同反應時間下取樣﹐測定底物水解率。
超聲酶促反應:與常規酶解相同溫度和 pH值條件下,在超聲頻率為20 kHz,超聲作用與間歇時間比為1∶1,于不同的超聲輸出功率和反應時間下,測定底物水解率。
結論:
研究結果表明,超聲波在一定的功率和作用方式下,能提高胰蛋白酶水解酪蛋白的速度,即使酶活性提高,酶的米氏常數Km減小,酶與底物的親和力增強;超聲場下在較低溫度下,能顯著提高酪蛋白水解率,在5℃時超聲場下的水解率已達到54%,比對照提高了4.4 倍,達到最高水解率的31.3%,在工業生產中具有實際意義.此外,超聲波使底物和胰蛋白酶熒光光譜、熒光強度發生變化,超聲波對酶作用機理還有待于進一步深入研究。
產品名稱:酪蛋白,FITC標記
中文名稱:酪蛋白,FITC標記
英文名稱:Casein, FITC labeled
分類:蛋白標記
溶解性:/
規格:mg
純度:95%+
儲存:/
用途:科研
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