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當前位置：深圳市安培生物科技有限公司>>技術文章>>葉綠體被膜完整性的測定
原理
材料與儀器
步驟
1. 取0.1ml葉綠體提取液加到0.9ml的蒸餾水中并攪拌1min，使葉綠體被膜脹破，加1ml測定介質Ⅰ懸浮備用。
2. 取0.1ml未脹破葉綠體提取液加入反應杯中，視反應杯體積加入測定介質Ⅱ，加入適量鐵氰-化-鉀和NH4Cl，使鐵氰-化-鉀和NH4Cl的最終濃度都為1mmol/L。攪拌，平衡1min，照光測定Hill反應放氧速率，記錄5min，然后清洗反應杯。
3. 將已脹破葉綠體加入反應杯中，再加入適量測定介質Ⅱ、鐵氰-化-鉀和NH4Cl，使反應體系物質最終濃度同未脹破葉綠體測定體系，測定過程同2。
4. 分別計算脹破和未脹破的葉綠體測定體系中單位時間的放氧量（或Hill反應速率）。
5. 計算被膜完整度。
注意事項
1. 本實驗所用玻璃要存放在冰箱中，存放時間不宜過長，最好現配現用。
2. 葉綠體的分離要在0~4℃下進行，玻璃器皿和溶液都須預冷，操作要快，整個分離過程最好在5min內完成。
3. 離心過程中離心機的轉速不宜過高，否則葉綠體中的淀粉粒會打破葉綠體被膜。
4. 被膜完整度的測定過程中，反應杯內破碎葉綠體與完整葉綠體的葉綠素含量應相等。
常見問題
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