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zeta life轉染造血干細胞(HPCs)共轉染2種質粒DNA(IF11.556)論文分享
zeta life轉染造血干細胞(HPCs)共轉染2種質粒DNA(IF11.556)論文分享編輯
一、 轉染造血干細胞(HPCs)或造血祖細胞-共轉染兩種質粒DNA文章概述:
檢測特異性蛋白Sp1對FcγRIIB的影響在造血干細胞(HPCs )中表達,F(xiàn)cγRIIB 啟動子區(qū)域為(-1500 ~ +1從轉錄起始位點),合成并亞克隆到pGL3載體, Sp1結合位點 5'-GGGGCGGGGC突變?yōu)?5'-AAGGCAAGGC,含有 Sp1過表達或含有模擬物。
使用美國Zeta Life公司Advanced DNA RNA轉染試劑(#AD600025,Zeta Life, USA)對造血干細胞(HPCs )共轉染 1 μg 報告載體和 20 ng pSV-Renilla 表達載體(含、模擬物和 Sp1),轉染的細胞是孵育 48 小時后收細胞并檢測。
文章作者:重慶大學附屬腫瘤醫(yī)院腫瘤內(nèi)科IF11.556
標題:FcγRIIB potentiates differentiation of myeloid-derived suppressor cells to mediate tumor immunoescape
二、轉染造血干細胞(HPCs)
zeta life轉染造血干細胞(HPCs)共轉染2種質粒DNA(IF11.556)論文分享 編輯
FcγRIIB promoter luciferase reporter assay
To measure the effect of Sp1 on FcγRIIBexpression in HPCs, the FcγRIIB promoter region
(-1500 ~ +1 from the transcription starting site) wassynthesized by GenScript co., LTD (Nanjing, China)and subcloned into pGL3-basic vector (Promega,Madison, WI, USA), Sp1 binding site 5’-GGGGCGGGGC was mutated to 5’-AAGGCAAGGC.Lentivectors containing Sp1 overexpression or a lentivector containing mock were obtained from Genechem (Shanghai, China). The HPCs were transfected with 1 μg of reporter vector and 20 ng of pSV-Renilla expression vector (mock and Sp1) using Advanced DNA RNA Transfection Reagent (Cat No.AD600025, Zeta-life). Transfected cells were incubated for 48 h, Luciferase and Renilla activitie were measured using the dual-luciferase reporter system kit (Cat No. E1910, Promega). The transfection was performed according to the manufacturer' protocol.
三、美國Zeta Life 公司與美國加利福尼亞大學舊金山校區(qū)聯(lián)合開發(fā)用于哺乳動物細胞、活體動物轉染的 Advanced DNA RNA 第三代多肽小分子轉染試劑,此技術成為新的蛋白功能、免疫細胞及干細胞治療、研發(fā)及生產(chǎn)的主要關鍵技術之一。
四、文獻中所用轉染試劑產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱:Advanced DNA RNA 轉染試劑
貨號:AD600025、AD600050、AD600075、AD600150
規(guī)格:0.25ML、0.5ML、0.75ML、1.5ML
安培生物科技有限公司是美國 Zeta Life 公司的中國代理商。Advanced DNA RNA轉染試劑,均經(jīng)過反復充分驗證,轉染效果好且重復性佳,提供完整售后服務和技術支持。
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安培生物科技有限公司介紹:
安培生物堅持為生命科學研究、活體動物轉染、大規(guī)模生物生產(chǎn)、基因和細胞治療領域客戶,提供*細胞體內(nèi)可代謝的核酸轉染試劑;inviCELL™Platelet lysate無動物血清產(chǎn)品旨在支持廣泛的細胞擴增和生產(chǎn),包括培養(yǎng)間充質干細胞和多種免疫細胞系等,為制藥公司或者生物技術公司提供無血清細胞培養(yǎng)規(guī)模生產(chǎn)服務;提供以植物生物為平臺基因序列全人源化、*的細胞培養(yǎng)可分解3D基質膠產(chǎn)品;提供內(nèi)毒素≦ 1.0 EU/mL、對細胞無毒性影響、高純度的一型膠原蛋白產(chǎn)品。安培生物專注為生物醫(yī)藥領域提供優(yōu)質的產(chǎn)品和技術服務,努力發(fā)展為基因治療、細胞治療的生物科技企業(yè)。
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