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qPCR中的相對定量是什么?

時間:2021/10/14閱讀:3023
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相對定量常用于測定兩個不同樣品中靶基因量的差異,例如使用實時RT-PCR法定量檢測mRNA水平的實驗。


進行相對定量實驗分析兩個不同樣品的實驗數(shù)據(jù)時,需要對數(shù)據(jù)進行歸一化處理,設(shè)置其中一個樣品的靶基因表達量為“1"。這個樣品稱為校準(zhǔn)品,常使用表達恒定的內(nèi)參基因。


通常,校準(zhǔn)品歸一化后,待測樣品靶基因表達量以比“1"增加或降低n倍來表示,來顯示表達量的差異。

qPCR中的相對定量是什么?

值得注意的是,實驗必須從等量原料中取得校準(zhǔn)品和待測樣品的靶基因,否則比較無意義。


與絕對定量相比,相對定量實驗優(yōu)點在于內(nèi)參基因的使用,能規(guī)避實驗操作產(chǎn)生的差異,而且不需要制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。


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