人脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞（P2代）產(chǎn)品信息：  

 人脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞（P2代）產(chǎn)品特性：

本產(chǎn)品經(jīng)過中國食品藥品檢定研究院檢定，檢定項目包括細(xì)胞鑒別試驗、無菌檢查、分枝桿菌檢查、支原體檢查、細(xì)胞內(nèi)外病毒因子檢查、免疫學(xué)反應(yīng)檢測、生物學(xué)效力檢測、細(xì)胞活性檢測、成瘤性檢查等300余項，結(jié)果符合國家食藥監(jiān)發(fā)布的《細(xì)胞治療產(chǎn)品研究與評價技術(shù)指導(dǎo)原則》的標(biāo)準(zhǔn)要求。  

注意事項：  

在無菌條件下處理該產(chǎn)品；  

為確保培養(yǎng)效果，建議配套使用本公司專用的、凍存液等配套試劑；該產(chǎn)品科研使用，使用代次建議不要超過P10代。  

產(chǎn)品保存：   

收到產(chǎn)品后，檢查產(chǎn)品是否有破損及是否處于凍存狀態(tài)。若處于凍存狀態(tài)，立即放置于-80℃的深低溫。    

冰箱或液氮中保存；若已解凍，請拍照記錄向廠家反饋情況再進(jìn)行廢棄。  

收到產(chǎn)品后，請立即放置于-80℃的深低溫冰箱或液氮中至少3d后再進(jìn)行復(fù)蘇操作，以保證產(chǎn)品的穩(wěn)定性和細(xì)胞活率。  

產(chǎn)品復(fù)蘇：   

開啟水浴鍋預(yù)熱至37℃，干細(xì)胞專用培養(yǎng)基提前預(yù)熱至25℃左右；  

無菌條件下，吸取10ml專用培養(yǎng)基加入到15ml離心管中備用；  

從低溫容器中取出凍存管，立即置于水浴中來回迅速搖晃，直至凍存液解凍，此過程控制在2min以內(nèi)。 

注意：  

①盡可能避免水沒過凍存管帽，建議用鑷子夾住凍存管連續(xù)晃動，以降低污染的風(fēng)險  

②2min內(nèi)務(wù)必完成細(xì)胞復(fù)蘇過程，時間過久會導(dǎo)致復(fù)蘇細(xì)胞活率較差，無法貼壁  

待細(xì)胞凍存液解凍，用75%酒精擦拭凍存管的外壁后拿入超凈臺內(nèi)

無菌條件下，迅速將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至含有10ml專用培養(yǎng)基的離心管中，用移液管輕柔吹打混勻細(xì)胞后進(jìn)行接種，按照(1-1.5)Ⅹ104cell/cm2的密度進(jìn)行接種(例如：100萬/管細(xì)胞可接種至3個T-25培養(yǎng)瓶中或1個T-75培養(yǎng)瓶中)  

注意：  

①由于剛復(fù)蘇的細(xì)胞比較脆弱，請勿離心處理，整個操作過程保持輕柔  

②為了保證復(fù)蘇培養(yǎng)效果，推薦使用Corning等國際的培養(yǎng)瓶/皿  

將培養(yǎng)瓶/皿置于平面上，輕柔上下左右十字搖晃5次，使細(xì)胞懸液均勻分布于培養(yǎng)瓶/皿中；在培養(yǎng)瓶/皿上方標(biāo)識好細(xì)胞信息，轉(zhuǎn)移至5%CO2、37℃、濕度為95%的二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)

注意：為了保證貼壁效果，2h請勿移動培養(yǎng)瓶/皿  

24h后進(jìn)行全量換液處理，之后每隔2天換液一次；當(dāng)細(xì)胞匯合度達(dá)到80-90%時，進(jìn)行傳代處理