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細胞培養基礎(一)

閱讀:1504      發布時間:2021-9-27
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環境保持

相信很多新手朋友都會遇到這種情況,自己培養的細胞養的好好的,突然有一天細胞培養基渾濁了、變黃、飄著一些霉菌團或者顯微鏡下全是樹枝樣的霉菌菌絲,起初還只是一兩個培養瓶有這種情況,過段時間就大面積都出現這種情況了。出現以上情況的時候,很多剛開始接觸細胞培養的人都不知道怎么污染的,更不知道如何處理。那么接下來,小編就帶你們看看怎么從環境上降低細胞被污染的概率。

首先我們要知道,造成細胞污染的污染物不是憑空產生的,而是環境或者人為帶入的,那么我們就要從環境和個人方面入手。接下來,就讓我們詳細的了解下具體需要注意哪些事項吧。


一、 細胞室設計

細胞室設計可別小看這點,很多實驗室長期出現污染都與這個有很大關系。

1. 細胞室應設計合理的通風、緩沖區域。

細胞室的空氣要保持清潔,需要對流入的空氣進行過濾,防止外界污染通過空氣傳播。人員進入細胞室,需要經過緩沖室,緩沖室的作用就是避免開門進出時外界的空氣直接與細胞室內流通,同時還有另外一個功能,就是人員穿戴實驗服、防具的可以在這里進行,避免人體身上灰塵、皮屑等直接進入細胞室。

2. 細胞室位置避免陽光直射、隔離水源、通風良好。

避免陽光直射,可以直接降低細胞室夏天的空調費用,這個應該沒有人有疑問。不過還有另外一個重要原因,我們目前培養的細胞大部分都是37度培養的,所以氣溫需要維持37度以下,甚至部分國產培養箱需要保持室溫30度以下才能正常工作。隔離水源可以避免水池里滋生的各種細菌、真菌等,降低實驗室污染概率,切忌圖方便將水源引入細胞室,否則管理不善的話很容易出現各種污染的情況。細胞室需要經常保持通風,通風可以降低空氣濕度,尤其是南方梅雨季節,降低空氣濕度可以減少霉菌滋生的情況。

3. 細胞室超凈臺、生物安全柜應擺放合理。

超凈臺、安全柜都是通過過濾空氣來防止污染的,所以彼此之間應留出一定空間,避免出現互相吹風,影響各自工作的情況。

二、 個人裝備

 

個人裝備可以有效的防止人體自身攜帶的污染物污染細胞,同時也能為實驗者提供可靠的防護。

1. 換鞋,穿戴實驗服、手套、口罩是進入細胞室必須的。

細胞室是潔凈的環境,而人體自身會攜帶諸多污染物進入實驗室。換鞋,穿戴實驗服、手套、口罩可以很大程度上避免沾染的泥土、灰塵、皮屑、毛發、口腔細菌、支原體所致的污染。

2. 實驗服、手套、口罩可以給實驗者提供防護。

有部分細胞是會表達一些病毒的,而且很多細胞都是人體瘤細胞,相信實驗者都不想直接接觸這些細胞,那么合理使用個人防護道具可以避免直接接觸,降低實驗者心理壓力。

三、環境維持

有合理設計的實驗室,合理使用個人裝備還不夠,還需要定期對環境進行維護,掃除漏網之魚。

1. 細胞室應定期紫外消毒。

細胞室內應在固定位置安裝紫外殺菌燈,通過紫外、臭氧雙重作用殺滅可能存在的污染物,保持環境潔凈。最好有定時開關,每天晚上人離開實驗室后,對實驗室進行1-2h的紫外殺菌。

2. 培養箱應定期清洗消毒。

培養箱是至關重要的一環,一旦污染,不加控制的話,勢必造成大面積污染的情況。培養箱建議1-2周換水一次,2-3個月進行一次清洗、整體消毒。如果平時污染比較嚴重的話,可以縮短消毒周期,避免長時間使用導致污染累積爆發。

3. 超凈臺、安全柜每次使用后應擦干凈臺面、紫外照射。

使用后用75%酒精棉擦干凈臺面,可以保持臺面清潔,美觀。使用超凈臺前,一定要紫外殺菌1-2h方可開始實驗。

4. 細胞室地面應定期用消毒液拖地。

地面是污染物最嚴重的地方,需要經常用84消毒液拖地,保持地面清潔。

5. 各種臺面、冰箱內部定期清洗消毒。

這些地方也是容易藏污納垢的地方,一定要經常用75%酒精擦洗干凈,保持清潔。

好了,今天分享的細胞培養經驗就到此為止了,我們下期再見。

武漢尚恩生物科技有限公司細胞培養間是無塵實驗室,可以最大限度避免環境污染所致的細胞污染現象,專業細胞培養實驗室為您提供更優質的細胞,助力您的科研。


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