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原代細(xì)胞復(fù)蘇的基本操作

閱讀:1162      發(fā)布時間:2021-9-9
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  原代細(xì)胞復(fù)蘇的操作步驟:
 
  (1)從液氮容器中取出凍存管,直接浸入37℃溫水中,并不時搖動令其盡快融化。
 
  (2)從37℃水浴中取出凍存管,75%酒精消毒后,打開蓋子,用吸管吸出細(xì)胞懸液,加到離心管中。PriCells推薦接種培養(yǎng)瓶,37℃培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng)。
 
  (3)離心,1000rpm,5min。PriCells推薦不離心。
 
  (4)棄去上清液,加入含10%小牛血清培養(yǎng)液重懸細(xì)胞,計數(shù),調(diào)整細(xì)胞密度,接種培養(yǎng)瓶,37℃培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng)。PriCells推薦小牛血清濃度依據(jù)原代細(xì)胞種類。
 
  (5)次日更換一次1/2培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng)。
 
  原代細(xì)胞復(fù)蘇操作注意事項(xiàng):
 
  (1)將凍存管從液氮容器中取出時,要做好防護(hù)工作,以免凍傷。
 
  (2)取出凍存管后立即放入水浴中,使其盡快融化(在1-2分鐘內(nèi))。
 
  (3)復(fù)蘇*好用新配制的培養(yǎng)液。

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