国产一级a毛一级a看免费视频,久久久久久国产一级AV片,免费一级做a爰片久久毛片潮,国产精品女人精品久久久天天,99久久久无码国产精品免费了

上海恒光智影醫療科技有限公司
初級會員 | 第2年

18201981612

利用白蛋白基花菁-克唑替尼偶聯納米粒子實現NIR-II成像引導的協同化學光療

時間:2023/8/14閱讀:139
分享:

引言:結直腸癌是目前世界shang第三致命的癌癥。與傳統的寬光篩查內窺鏡檢查相比,基于分子探針的近紅外-II (NIR-II)熒光成像能夠有效識別病變靶點,提高圖像對比度,提高早期腫瘤檢出率。c-Met在CRC晚期過度表達,是一種腫瘤生物標志物。在此,基于克唑替尼(Crizotinib)對c-Met陽性腫瘤細胞的良好靶向抑制作用,染料IR808與藥物分子Crizotinib共價結合,從而合成了靶向c-Met陽性腫瘤細胞的近紅外熒光探針Crizotinib-IR808。然后,水不溶性Crizotinib-IR808與具有生物相容性和生物安全性良好的牛血清白蛋白納米粒子(BSA NPs)制備了 Crizotinib-IR808@BSA NPs。Crizotinib-IR808@BSA NPs具有腫瘤靶向能力,可用于無chuang生物醫學血管NIR-II成像和術中實時NIR-II成像,以指導腫瘤切除。在808 nm激光照射下,Crizotinib-IR808 @ BSA NPs對腫瘤表現出協同光療效應??傊?,這種創新的影像介導的多功能聯合治療策略具有良好的c-Met靶向能力,可能成為一種新的治療結直腸癌的方法。




研究內容:作者設計并合成一種Crizotinib-IR808偶合物,以研究其在結直腸癌中的NIR-II成像引導的協同化學光療。選擇Crizotinib的哌啶胺作為IR808的連接子,因為該區域暴露于與Crizotinib共結晶的c-Met晶體結構中的溶劑區域。根據預測,該區域的化學變化對Crizotinib與c-Met 的ATP結合口袋中的關鍵殘基的相互作用幾乎沒有影響,從而保持了藥物-染料偶聯物的效力。然后,使用具有高穩定性、非抗原性和生物安全性的牛血清白蛋白納米粒子制備Crizotinib-IR808 @ BSA NPs。將制備的Crizotinib-IR808 @ BSA NPs用于腫瘤NIR-II成像以及術中NIR-II成像引導的腫瘤切除。此外,還研究了Crizotinib-IR808 @ BSA NPs用于化療協同PDT和PTT的腫瘤消除。


圖1. Crizotinib-IR808@BSA的特性 (A) TEM圖像 (B)流體動力學粒徑和(C)ζ電勢。(D) Crizotinib -IR808和Crizotinib -IR808@BSA的吸收光譜和(E)近紅外熒光發射光譜(6μm)。(F)在不同溶劑中的NIR-II熒光圖像。(G) Crizotinib-IR808與BSA的分子對接(PDB ID: 6QS9)。(H)Crizotinib-IR808在含有白蛋白結合位點I、II、III和α1-羥基脂肪蛋白抑制劑的BSA水溶液中的歸一化發射強度。


TEM圖像顯示,Crizotinib-IR808 @ BSA NPs呈球形,在水溶液中均勻分布,直徑為128.8 ± 9.4 nm。DLS實驗表明,平均水合直徑為156.3 nm,與TEM的結果相符。與BSA相比,Crizotinib-IR808@BSA NPs的ζ電勢向正方向移動了-5.2mV。紫外-可見吸收光譜顯示,水中的Crizotinib-IR808 @ BSA NPs在778 nm處出現明顯的吸收峰,與DMSO中的Crizotinib-IR808相似,比水中的游離Crizotinib-IR808懸浮液的吸收峰更尖銳。通過光穩定性實驗得出Crizotinib-IR808@BSA NPs的光穩定性強于Crizotinib-IR808,證明BSA NPs是防止Crizotinib-IR808在水中聚集或水解的有效方法。使用先前報道的方法,作者更詳細地評估了Crizotinib-IR808的BSA結合位點。白蛋白結合位點I、II、III和1-羥基糖脂蛋白的抑制劑分別是華法林、布洛芬、地高xin和奎尼啶,發現華法林能夠顯著降低熒光,表明對白蛋白Sudlow位點I具有高親和力。


圖2. 體外光熱效應和ROS生成 (A)不同梯度濃度和(B)不同輻照強度下的實時紅外熱像圖和溫度變化曲線。(C)光熱轉換效率 (D)光熱穩定性。(E)用Crizotinib-IR808@BSA進行DPBF預培養的吸收光譜。(F)在DMSO中用不同輻射強度的Crizotinib-IR808@BSA進行DPBF預培養的相對吸光度。


研究了Crizotinib-IR808@BSA NPs的光轉化能力,得出其溫度升高與濃度和激光強度有關。與臨床常用的光敏劑ICG相比,Crizotinib-IR808@BSA NPs有更好的PCE。為了研究光穩定性,通過五次激光ON/OFF加熱循環,Crizotinib-IR808@BSA NPs光熱性能幾乎不變。然后研究了 Crizotinib-IR808 和 1O2 探針 DPBF 混合物的紫外可見光譜,以確定產生 ROS 的能力。發現在 Crizotinib-IR808@BSA NPs 的存在下,DPBF 在 415nm波長處的吸收強度隨時間和激光功率的變化而下降。鑒于這些發現,Crizotinib-IR808 @BSA NPs可能成為808 nm單波長激光協同PDT/PTT治療的候選藥物。


圖3. 體外協同抗腫瘤作用 (A) CT26 細胞中Crizotinib-IR808@BSA 與 Mito-Tracker Green的共聚焦顯微圖像。(B) 使用或不使用激光照射的情況下,用Crizotinib-IR808@BSA處理CT26細胞24 h的存活率。CT26細胞在不同處理組中的(C) DCFH-DA染色熒光圖像、(D)Calcein AM/PI 染色熒光圖像和(E)膜聯蛋白V-FITC/PI分析。


接著,分析了在細胞水平的性能。首先,應用流式細胞術和CLSM研究CT26細胞對Crizotinib-IR808@BSA NPs的攝取。結果發現,細胞攝取出現在前30 min內,2 h后趨于穩定。Crizotinib-IR808@BSA NPs 的紅色信號與Mito-track探針的綠色信號呈現出共定位,表明它能夠在線粒體積累。DCFH-DA是ROS檢測器,在IR808和Crizotinib-IR808 @ BSA NPs+激光組中觀察到綠色熒光,表明它們可被激光激活誘導ROS生成。使用Calcein AM/PI進行染色實驗,以識別活體(綠色)和死亡(紅色)的 CT26 細胞,發現激光照射產生的光療與化療協同作用,增加了Crizotinib- IR808@BSA NPs對癌細胞的毒性。


圖4. 體內NIR-II熒光成像性能 (A)注射Crizotinib -IR808@BSA后不同時間點荷瘤小鼠的NIR-II熒光圖像和(B)腫瘤的熒光強度。(C)Crizotinib-IR808@ BSA注射后24小時NIR-II成像下手術過程圖像。(D)注射Crizotinib -IR808@BSA后主要器官及腫瘤熒光強度的離體熒光圖像和(E)半定量分析。


為了探究體內腫瘤成像能力,將Crizotinib-IR808 @ BSA NPs注射到CT26荷瘤小鼠中,發現熒光亮度在24 h達到max值,72 h后減弱。之后,在NIR-II成像指導下對CT26荷瘤小鼠進行了腫瘤切除,證明Crizotinib-IR808 @ BSA NPs能夠正確指導腫瘤的切除。對切除的腫瘤和主要器官進行了離體NIR-II成像分析,發現Crizotinib-IR808 @ BSA NPs對腫瘤具有高選擇性,此外還在肝臟和腎臟中聚集,并且兩者的信號強度都隨著時間降低,表明可能存在的排泄途徑。


圖5. 抗腫瘤作用 (A)體內光熱圖像和(B)相應的腫瘤部位溫度曲線。(C)不同治療后,切除的腫瘤照片(D)體重變化曲線(E) 腫瘤相對體積增長 (F)腫瘤重量(G)無發病生存期(H)腫瘤切片H&E染色、免疫熒光TUNEL染色。



為了探究體內光療抗腫瘤活性,通過紅外溫度計跟蹤荷瘤小鼠的溫度波動,發現Crizotinib-IR808 @ BSA NPs在體內能維持接近50℃的溫度殺死腫瘤細胞,同時減輕在過高溫度(> 60°C)對正常組織的傷害。進一步研究其協同光熱治療的抗癌效果,在接受激光照射后,給予Crizotinib-IR808@BSA NPs的小鼠中的腫瘤顯著縮小且大部分消失,腫瘤的相對體積和重量均有顯著降低。各組之間的體重輕微增加且無顯著差異,這表明治療通常耐受良好。染色實驗顯示與對照組(單獨使用PBS、PBS +激光和Crizotinib-IR808@BSA NPs)相比,Crizotinib-IR808@BSA NPs +激光治療組的腫瘤細胞壞死/凋亡面積更大。以上結果與體外實驗結果一致,表明激光照射Crizotinib-IR808 @ BSA NPs可與化療、PDT和PTT同時進行,以抑制腫瘤。


圖6. 體內毒理學分析 (A)CT26荷瘤小鼠不同治療后血液生物標志物的血液生化測定。(B)不同治療組的主要器官代表性H&E染色圖像。


為了探究Crizotinib-IR808@BSA NPs的毒性和藥代動力學,對小鼠血液中的Crizotinib-IR808濃度進行實時半定量,得到其半衰期為24.23 min。血試驗測量了紅細胞(RBC)的溶血率,測定結果溶血率低于1%,表明Crizotinib-IR808 @ BSA NPs具有優異的血液相容性。通過血液生化分析進一步證實了使用Crizotinib-IR808 @ BSA NPs治療對肝、腎或心臟功能參數無影響。此外,注射Crizotinib-IR808 @ BSA NPs的健康小鼠的主要器官的H&E染色照片也顯示,未對小鼠產生顯著毒性。根據這些發現,Crizotinib-IR808 @ BSA NPs具有較高的腫瘤靶向化療光療作用和較低的副作用發生率。


總結與展望:作者設計的Crizotinib-IR808 @ BSA NPs已成功用于體內NIR-II成像引導的化學光療。Crizotinib-IR808是由臨床應用藥物Crizotinib和近紅外熒光染料IR808共價結合而成。Crizotinib-IR808的du特結構賦予其c-Met靶向能力、優異的1O2生成效率和高光熱轉換效率,具有良好的體內治療應用前景。通過BSA封裝,Crizotinib-IR808的光學穩定性和水溶性得到改善,并且還顯著改善了結直腸癌中的特異性積聚,從而更容易區分脈管系統、腫瘤和周圍邊界。除了提高小鼠壽命和消除腫瘤外,這種治療方法在作者的研究中也顯示出相對最小的不良作用。該生物相容性分子蛋白復合物治療探針具有高時空分辨率NIR-II成像模式和高效治療功能,有望用于腫瘤的精確檢測和高效治療。


參考文獻

Hu, Z.; Li, R.; Cui, X.; Chen, Z., Albumin-Based Cyanine Crizotinib Conjugate Nanoparticles for NIR-II Imaging-Guided Synergistic Chemophototherapy. ACS Applied Materials & Interfaces 2023, 15 (28), 33890-33902.



?? ?? ??


近紅外二區小動物活體熒光成像系統 - MARS 

NIR-II in vivo imaging system

高靈敏度 - 采用Princeton Instruments深制冷相機,活體穿透深度高于15mm

高分辨率 - 定制高分辨大光圈紅外鏡頭,空間分辨率優于3um

熒光壽命 - 分辨率優于 5us

高速采集 - 速度優于1000fps (幀每秒)

多模態系統 - 可擴展X射線輻照、熒光壽命、一區熒光成像、原位成像光譜,CT等

顯微鏡 - 近紅外二區高分辨顯微系統,兼容成像型光譜儀

 


?? ?? ??


 恒光智影

          上海恒光智影醫療科技有限公司,被評為上海市“科技創新行動計劃"科學儀器領域立項單位。

          恒光智影,致力于為生物醫學、臨床前和臨床應用等相關領域的研究提供*的、一體化的成像解決方案。

          與基于可見光/近紅外一區的傳統熒光成像技術相比,我們的技術側重于近紅外二區范圍并整合CT, X-ray,超聲,光聲成像技術。

          可為腫瘤藥理、神經藥理、心血管藥理、大分子藥代動力學等一系列學科的科研人員提供清晰的成像效果,為用戶提供前沿的生物醫藥與科學儀器服務。


會員登錄

×

請輸入賬號

請輸入密碼

=

請輸驗證碼

收藏該商鋪

X
該信息已收藏!
標簽:
保存成功

(空格分隔,最多3個,單個標簽最多10個字符)

常用:

提示

X
您的留言已提交成功!我們將在第一時間回復您~
撥打電話
在線留言
主站蜘蛛池模板: 百色市| 赤峰市| 高青县| 安顺市| 琼中| 伊春市| 神农架林区| 泸溪县| 逊克县| 泰兴市| 辽源市| 皋兰县| 微博| 大姚县| 定州市| 日喀则市| 常州市| 马鞍山市| 尖扎县| 昭平县| 延津县| 绵阳市| 商都县| 威宁| 黄陵县| 电白县| 邹平县| 广饶县| 阿图什市| 肃南| 玉林市| 安平县| 海淀区| 门头沟区| 石棉县| 黄梅县| 广西| 汶上县| 陆河县| 东光县| 高淳县|