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詳細介紹
產品簡介
BW25113 菌株來源于 E. coli K12 W1485，是 K12 的衍生菌株，與 MG1655 類似，也是一種經過較
少改造，比較接近于“野生型"的大腸桿菌工程菌株。BW25113 作為母系菌株，可以用來制作 E. coli
Keio Knockout 文庫；同時可作為大腸桿菌模式菌株使用，用來制作各種基因的 Knockout 突變體。
另外，BW25113 可用于構建、擴增質粒使用，但是不含核酸酶 endA1 突變，因此體內核酸酶含量
較高，提取質粒時務必使用質粒提取試劑盒中去蛋白液盡量去除核酸酶，以防提取的質粒被降解。
BW25113 感受態細胞經特殊工藝制作，pUC18 質粒檢測轉化效率>108 cfu/μg DNA。
產品組成
組分
BW25113 感受態細胞
10 × 100 μL
100 × 100 μL
定制
基因型：F-, DE(araD-araB)567, lacZ4787(del)::rrnB-3, LAM-, rph-1, DE(rhaD-rhaB)568, hsdR514
存儲條件
-80 ℃保存；請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
質量控制
無外源質粒 DNA 殘留；
化學法轉化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA。
使用方法
1. 將感受態細胞從-80 ℃中取出，置于冰水浴中融化；
2. 將待轉化 DNA 加入到 100μL 感受態細胞中，輕輕彈勻，冰上孵育 30min；
3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中，不要晃動，熱激 90s 后，立刻置于冰水浴中靜置 2-3 min；
4. 向離心管中加入 900μL LB 或 SOC 培養基（室溫或 37 ℃預熱），然后置于 37 ℃搖床復壯 45 min；
5. 取不同體積的轉化產物，用無菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上，于 37 ℃培養箱培養過夜。
注意事項
1. 感受態細胞冰水浴中解凍后應立即使用；
2. 加入的待轉化 DNA 的總體積不應超過感受態細胞體積的 1/10；
3. 加入待轉化 DNA 后，不要用移液器吹吸感受態細胞，僅用手指輕彈即可；
4. 為確保優良轉化效率，整個操作過程中除熱激外均要保持低溫，并且要盡量輕柔
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