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XL1-Blue感受態(tài) 技術新聞

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更新時間:2023-04-27 20:49:35瀏覽次數(shù):441

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 應用領域 生物產(chǎn)業(yè)
XL1-Blue感受態(tài) 公司新聞

詳細介紹

XL1-Blue:                                                     100μl/支

pUC19 (control vector,10pg/μl):                     10μl

保存條件(保質(zhì)期):                         -80℃(6個月)

 

基因型

recA1 endA1 gyrA96 thi-1 hsdR17 supE44 (rk-,mk+), relA1 lac [F' proAB lacIqZ?M15: Tn10 (TetR)]

 

 

 

 

產(chǎn)品說明

XL1-Blue菌株能保證高拷貝質(zhì)粒穩(wěn)定復制,recA1和endA1的突變有利于插入DNA的穩(wěn)定和高純度質(zhì)粒DNA的提取。hsdR17突變導致EcoK核酸內(nèi)切酶系統(tǒng)缺失,增強了外源DNA的穩(wěn)定性和提取質(zhì)量。 lacIqZΔM15 的存在使XL1-Blue菌株可用于藍、白斑篩選。此菌株具有四環(huán)素抗性。XL1-Blue感受態(tài)細胞經(jīng)特殊工藝制作,pUC19質(zhì)粒檢測轉(zhuǎn)化效率>109cfu/μg DNA。

 

操作方法

1. XL1-Blue感受態(tài)細胞從-80℃拿出,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化,加入目的DNA (質(zhì)?;蜻B接產(chǎn)物) 并用手打EP管底輕輕混勻 (避免用槍吸打),冰中靜置25分鐘。

2. 42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰上并靜置2分鐘,晃動會降低轉(zhuǎn)化效率。

3. 向離心管中加入700μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基 (2YTLB),混勻后37℃,200rpm復蘇60分鐘。

4. 5000rpm離心一分鐘收菌,留取100μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的2YTLB培養(yǎng)基上。

5. 將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。 

 

注意事項

1. 感受態(tài)細胞好在冰中緩慢融化,插入冰中8分鐘內(nèi)加入目標DNA,不可在冰中放置時間過長,長時間存放會降低轉(zhuǎn)化效率。

2. 混入質(zhì)?;蜻B接產(chǎn)物時應輕柔操作。

3. 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)粒或高效率的連接產(chǎn)物可相應減少終用于涂板的菌量。

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