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JM330 感受態(tài) 技術(shù)新聞

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更新時(shí)間:2023-04-27 20:32:56瀏覽次數(shù):402

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 應(yīng)用領(lǐng)域 生物產(chǎn)業(yè)
JM330感受態(tài) 公司新聞

詳細(xì)介紹

JM330:                                                     100μl/支

pUC19 (control vector,10pg/μl):                   10μl

保存條件(保質(zhì)期):                            -80℃(6個(gè)月)

 

 

 

基因型

 

F- φ80 lacZ?M15 ?(lacZYA-argF)U169 recA1 endA1 hsdR17(rk-, mk+) phoA supE44 λ-thi-1 gyrA96 relA1 tonA

 

 

產(chǎn)品說(shuō)明

JM330菌株(即DH5α T1 Phage Resistant),來(lái)源于DH5α菌株。在DH5α大腸桿菌基因組中引入tonA,賦予其抗噬菌體T1,T5的能力,即為JM330。JM330菌株大的特點(diǎn)是其可以在體內(nèi)特異性降解甲基化質(zhì)粒模板,廣泛應(yīng)用于各種DNA定點(diǎn)突變?cè)囼?yàn)中。JM330菌株缺失核酸內(nèi)切酶 (endA1)和重組酶(recA1),提高了質(zhì)粒DNA的產(chǎn)量和質(zhì)量; lacZΔM15的存在使JM330可用于藍(lán)、白斑篩選。唯地生物開發(fā)的JM330感受態(tài)細(xì)胞經(jīng)特殊工藝制作,pUC19質(zhì)粒檢測(cè)轉(zhuǎn)化效率>1×10cfu/μg DNA。

 

 

 

 

操作方法

1. JM330感受態(tài)細(xì)胞從-80℃拿出,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化,加入目的DNA(例如:Dpn I消化產(chǎn)物等)并用手打EP管底混勻,冰中靜置25分鐘。

2. 42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰上并靜置2分鐘,晃動(dòng)會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。

3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無(wú)菌培養(yǎng)基 (LB),混勻后37℃,200 rpm復(fù)蘇70分鐘。

4. 5000 rpm離心1分鐘收集菌體,留取50 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的LB培養(yǎng)基上。

5. 將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱至少15小時(shí)。

 

 

 

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