化工儀器網
產品簡介
羊肺腺瘤病毒PCR檢測試劑盒運輸及保存：低溫運輸，-20℃保存，有效期一年。使用本試劑盒提供的陽性對照時，由于其濃度較高，一定要注意不要污染其他試劑和成分。在專門的區域操作。
詳細介紹
羊肺腺瘤病毒PCR檢測試劑盒特異性強
PCR反應的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結合；
②堿基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性；
④靶基因的特異性與保守性。
產品名稱 | |
英文名稱 | Jaagsiekte Sheep Retrovirus(JSRV)RTPCR |
貨號 | YS30990-R |
原理是由一對引物介導，能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增，經過n個熱循環擴增，擴增產物中所含特定基因數是原始模板數的(1+E)n(0＜E＜1,擴增效率＝倍，使得檢測擴增產物中的特定基因成為可能。
適用范圍【參考值】
1.試劑盒有效性判定：
（1）陽性對照：有典型S型擴增曲線或Ct值≤35。
（2）陰性對照：Ct值＞38或無Ct值，線形為直線或輕微斜線，無指數增長期。
2.標本結果判定：
（1）陽性：標本檢測結果Ct值≤35或有明顯指數增長期。
（2）可疑：標本檢測結果Ct值在35～38范圍內。此時應對標本進行重復檢測，如重復實驗結果Ct值仍在35～38范圍內，有明顯指數增長期，則判定為陽性，否則為陰性。
（3）陰性：標本檢測結果Ct值＞38或無Ct值。
PCR實驗步驟:
典型的PCR由（1）高溫變性模板；（2）引物與模板退火；（3）引物沿模板延伸三步反應組成一個循環，通過多次循環反應，使目的DNA得以迅速擴增。
其主要步驟是：
將待擴增的模板DNA置高溫下（通常為93℃-94℃）使其變性解成單鏈；
人工合成的兩個寡核苷酸引物在其合適的復性溫度下分別與目的基因兩側的兩條單鏈互補結合，兩個引物在模板上結合的位置決定了擴增片段的長短；
耐熱的DNA聚合酶（Taq酶）在72℃將單核苷酸從引物的3’端開始摻入，以目的基因為模板從5’→3’方向延伸，合成DNA的新互補鏈。
下列是公司正在*的產品：
MLH1 antibody [G168-15]原裝、分裝嗎啉惡（雷奈佐利， 利奈唑胺，利奈唑，利奈唑 ）
Prion protein PrP antibody [7D9]原裝、分裝嗎啉惡（雷奈佐利， 利奈唑胺，利奈唑，利奈唑 ）
AP3B2 antibody原裝、分裝嗎啉惡（標準品）
C3 antibody原裝、分裝賴諾普利
GNAI3 antibody原裝、分裝賴諾普利
GAPDH antibody - Loading Control原裝、分裝賴諾普利
POLR2K antibody原裝、分裝賴諾普利(標準品)
RGS8 antibody原裝、分裝鹽洛貝林
F-spondin antibody原裝、分裝氯尼達明Human LATS2 peptide原裝、分裝頭孢烯
TMPRSS13 antibody - Cytoplasmic domain原裝、分裝頭孢烯
S1P antibody原裝、分裝愈創木酚縮水甘油醚
PD-L2 antibody [TY25] (FITC)原裝、分裝愈創木酚縮水甘油醚
Recombinant Mouse EPO protein原裝、分裝8-羥基喹啉
Recombinant Human Cyclin C protein原裝、分裝8-羥基喹啉
BMPR1A antibody原裝、分裝基烯酯;α-基烯酯
Recombinant Human IRF2 protein原裝、分裝4-氨基安替比林
Parvovirus antibody [5G7]原裝、分裝N-溴代二酰亞胺(NBS)
羊肺腺瘤病毒PCR檢測試劑盒Pumilio 2 antibody [EPR3813]原裝、分裝2,4'-二羥基二苯(>98.0%(GC))
Nestin antibody - Neural Stem Cell Marker原裝、分裝4,4'-二氨基-3,3'-二基二苯(>95.0%(T))
US3 antibody原裝、分裝4,4'-二羥基四苯(>98.0%(GC))
Integrin beta 3 antibody [VIPL2] (FITC)原裝、分裝4,4'-二羥基四苯(>98.0%(GC))
Bone marrow stromal cell antigen 1 antibody [SY11B5]原裝、分裝4,4'-亞基雙(2,6-二叔基苯酚)(>98.0%(GC))
Cardiac Troponin I antibody [19C7]原裝、分裝4,4'-亞基雙(2,6-二叔基苯酚)(>98.0%(GC))
Recombinant Human Histone H2B protein原裝、分裝2,2'-亞基雙(6-叔基-4-基苯酚)(>98.0%(GC))
Recombinant Rat HO-2 protein原裝、分裝2,2'-亞基雙(6-叔基-4-基苯酚)(>98.0%(GC))
Recombinant human Hsp70 protein原裝、分裝2,2'-亞基雙(6-叔基對酚)(>99.0%(GC))
實驗過程：
一、試劑準備
1. DNA模板
2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1（10pM） 2μl
引物2（10PM） 2μ
Taq酶（2U/μl） 1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，后在72℃ 保溫7min。
3．結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測
三、注意事項
１．PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環境中進行。好設立一個的PCR實驗室。
２．純化模板所選用的方法對污染的風險有影響。一般而言，只要能夠得到可靠的結果，純化的方法越簡單越好。
３．所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。