一、原理介紹:
高通量篩選(Highthroughputscreening,HTS)技術(shù)是指以分子水平和細胞水平的實驗方法為基礎,以微板形式作為實驗工具載體,以自動化操作系統(tǒng)執(zhí)行試驗過程,以靈敏快速的檢測儀器采集實驗結(jié)果數(shù)據(jù),以計算機分析處理實驗數(shù)據(jù),在同一時間檢測數(shù)以千萬的樣品,并以得到的相應數(shù)據(jù)庫支持運轉(zhuǎn)的技術(shù)體系
二、高通量篩選時每天要對數(shù)以千萬的樣品進行檢測,工作枯燥,步驟單一,操作人員容易疲勞、出錯。自動化操作系統(tǒng)由計算機及其操作軟件、自動化加樣設備、溫孵離心設備和堆棧4個部分組成。
三、應用領域:充分利用藥用資源、微量篩選系統(tǒng)、高度自動化操作、多學科理論和技術(shù)的結(jié)合、FLIPR熒光檢測法、AlphaScreen檢測法。
四、作用:
(1)放射性檢測技術(shù)美國學者GanieSM在高通量藥物篩選研究中,應用放射性測定法,特別是親和閃爍(SPA)檢測方法,使在96孔板上進行的樣本量實驗得到發(fā)展。該方法靈敏度高,特異性強,促進了高通量藥物篩選的實現(xiàn),但存在環(huán)境污染問題。
(2)AlphaScreen技術(shù)主要優(yōu)勢在于待測物質(zhì)的范圍寬泛,從小分子到大型復合物;均相體系、快速、穩(wěn)定,靈敏度更高;AlphaScreen檢測也不需要熒光標簽的引入,避免了空間位阻影響生物分子的相互結(jié)合;可用于檢測生物學粗提物例如細胞裂解物、血清、血漿、體液等,而不會影響測讀效果。