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色譜柱在使用前要進行活化操作

閱讀:1218        發布時間:2021-1-25
  液相色譜柱的活化操作,以常見的C18反相分析柱為例,出廠時一般都封裝有甲醇或乙腈等有機溶劑。隨著時間的推移,色譜柱內的有機溶劑緩慢揮發,色譜柱內可能出現氣泡。因此,新購買的色譜柱在使用前一般都要進行活化操作。
  下面以常見的4.6mmX150mm,5μm粒徑的C18反相分析柱為例:
  1.在活化色譜柱前,應先用相關試劑沖洗液相系統的流路,確保無污染物殘留。切換至封柱試劑(一般為甲醇或乙腈),置換流路內的試劑。
  2.停泵,將分析柱的進液口連上系統,移除出液口的堵頭,出液口不連上系統。傾斜放置色譜柱,使其出液口高于入液口。
  3.以0.1ml/min的流速沖洗色譜柱約5分鐘,切換至0.2ml/min的流速繼續沖洗。觀察色譜柱出液口,若連續出液,停泵,將色譜柱出液口接入液相系統。
  4.以0.1ml/min的流速沖洗色譜柱,5分鐘內將流速平穩提升至0.5ml/min繼續沖洗色譜柱。
  5.以0.5ml/min的流速沖洗色譜柱,期間觀察壓力與基線是否平穩,直到沖洗的總流量達到30個柱體積。
  6.活化完成。
  對于久置不用的類似型號色譜柱,再次使用前也可參考上述步驟進行活化。

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