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技術文章

創凌293細胞無血清培養基高產高效培養的優秀表現

閱讀:1032          發布時間:2023-3-29

CELL-WISE品牌的293細胞培養基是上海創凌生物科技有限公司獨立自主開發的無血清培養基,是從實驗室到大規模懸浮培養HEK293、293T、293等細胞的理想選擇。可實現293細胞的快速生長,大程度上保障了生產工藝的安全性和可靠性。適用于病毒學研究、腺病毒載體疫苗等生物技術領域的大規模工業化生產。


CELL-WISE 293培養基品

貨號:CW001

CELL-WISE 293培養基品牌產品特點:

瞬時轉染用培養基,適用于HEK293細胞高密度懸浮培養

無蛋白、無動物源、化學成分限定

即用型培養基,無需添加額外成分

CELL-WISE的293培養基參數規格:

外觀:

澄清透明紅色液體

滲透壓:

275±15 mOSM

pH:

6.9-7.4

無菌檢測:

無菌

內毒素:

<5 EU/mL

儲存條件

:2-8℃,避光

效期:

12個月

產品用途:

僅用于科學研究,不適用于人類或動物的診斷和治療

CELL-WISE的293培養基使用方法:

細胞馴化

1)直接馴化

大部分情況下,培養于其他培養基中的細胞,可以直接適應Balance CD 293 medium,只要按照日常傳代方式(稀釋)更換培養基即可。

2)漸進式馴化

注意:選用低代次、處于對數生長期的細胞進行馴化

①在原培養基中復蘇細胞并繼續使用該培養基傳代2到3次至細胞生長穩定,當細胞密度達到2x10 6 cells/ml后進行傳代,傳代細胞密度控制在0.5-0.6×10 6 cells/mL,5-10%血清的傳統培養基或其他無血清培養基與Balance CD 293培養基的比例為75:25;

②將細胞置于37℃,5% CO2,轉速為110-175 rpm的恒溫搖床中進行培養;

③當細胞密度3-4天后達到3x10 6 cells/ml且細胞活率>90%,傳代時5-10%血清的傳統培養基或其他無血清培養基與Balance CD 293培養基的比例為50:50,細胞密度控制在0.5×10 6 cells/mL。如細胞生長慢,可離心上清,留20%條件培養基,加入80%的5-10%血清的傳統培養基或其他無血清培養基與Balance CD 293 培養基比例為75:25的混合培養基,繼續培養;

④重復步驟③逐步增加Balance CD 293培養基所占的比例(5-10%血清的傳統培養基或其他無血清培養基與Balance CD 293 培養基的比例為25:75至10:90)直到100%的Balance CD 293培養基;

⑤經過在100%的 Balance CD 293 培養基中的幾次傳代培養,傳代后3-4天細胞的密度可以達到2-3×10 6 cells/mL,細胞活率大于90%,這說明細胞已經適應了Balance CD 293 培養基。之后進行細胞的傳代培養時,細胞的起始密度可以降到0.3×10 6 cells/mL,般傳代2-3次后再進行轉染實驗。

注意: 般細胞馴化過程中,三代細胞的狀態可能不是很好,但般從第四代狀態會有改善。



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