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CELL-WISE 293培養(yǎng)基品牌產品特點介紹
閱讀：810 發(fā)布時間：2022-1-6CELL-WISE 293培養(yǎng)基* 產品資料：
Balance CD 293 培養(yǎng)基適用于懸浮培養(yǎng)條件下的HEK293細胞（如293-F,293-T, Expi-293F等）的高密度生長和瞬時轉染表達。 Balance CD 293 培養(yǎng)基含有細胞生長所需的全部營養(yǎng)成份，無需添加任何添加物即可使用。（注意：此培養(yǎng)基不包含抗生素以及血清）
cell-wise 293無血清培養(yǎng)基
CELL-WISE 293培養(yǎng)基品牌產品特點:
瞬時轉染用培養(yǎng)基，適用于HEK293細胞高密度懸浮培養(yǎng)
無蛋白、無動物源、化學成分限定
即用型*培養(yǎng)基,無需添加額外成分
CELL-WISE的293培養(yǎng)基參數規(guī)格：
外觀：
澄清透明紅色液體
滲透壓：
275±15 mOSM
pH:
6.9-7.4
無菌檢測:
無菌
內毒素：
<5 EU/mL
儲存條件
：2-8℃，避光
效期：
12個月
產品用途：
僅用于科學研究，不適用于人類或動物的診斷和治療
CELL-WISE的293培養(yǎng)基使用方法：
細胞馴化
1）直接馴化
大部分情況下，培養(yǎng)于其他培養(yǎng)基中的細胞，可以直接適應Balance CD 293 medium，只要按照日常傳代方式（稀釋）更換培養(yǎng)基即可。
2）漸進式馴化
注意：選用低代次、處于對數生長期的細胞進行馴化
①在原培養(yǎng)基中復蘇細胞并繼續(xù)使用該培養(yǎng)基傳代2到3次至細胞生長穩(wěn)定，當細胞密度達到2x10 6 cells/ml后進行傳代，傳代細胞密度控制在0.5-0.6×10 6 cells/mL，5-10%血清的傳統(tǒng)培養(yǎng)基或其他無血清培養(yǎng)基與Balance CD 293培養(yǎng)基的比例為75:25；
②將細胞置于37℃，5% CO2，轉速為110-175 rpm的恒溫搖床中進行培養(yǎng)；
③當細胞密度3-4天后達到3x10 6 cells/ml且細胞活率>90%，傳代時5-10%血清的傳統(tǒng)培養(yǎng)基或其他無血清培養(yǎng)基與Balance CD 293培養(yǎng)基的比例為50:50，細胞密度控制在0.5×10 6 cells/mL。如細胞生長慢，可離心上清，留20%條件培養(yǎng)基，加入80%的5-10%血清的傳統(tǒng)培養(yǎng)基或其他無血清培養(yǎng)基與Balance CD 293 培養(yǎng)基比例為75:25的混合培養(yǎng)基，繼續(xù)培養(yǎng)；
④重復步驟③逐步增加Balance CD 293培養(yǎng)基所占的比例(5-10%血清的傳統(tǒng)培養(yǎng)基或其他無血清培養(yǎng)基與Balance CD 293 培養(yǎng)基的比例為25:75至10:90）直到100%的Balance CD 293培養(yǎng)基；
⑤經過在100%的 Balance CD 293 培養(yǎng)基中的幾次傳代培養(yǎng)，傳代后3-4天細胞的密度可以達到2-3×10 6 cells/mL，細胞活率大于90%，這說明細胞已經*適應了Balance CD 293 培養(yǎng)基。之后進行細胞的傳代培養(yǎng)時，細胞的起始密度可以降到0.3×10 6 cells/mL，般傳代2-3次后再進行轉染實驗。
注意: 般細胞馴化過程中，三代細胞的狀態(tài)可能不是很好，但般從第四代狀態(tài)會有改善。
細胞傳代
1）取細胞培養(yǎng)樣品，人工或儀器測定細胞密度以及活率；
2）計算傳代所需的細胞用量，建議起始細胞密度為0.2-0.4×10 6 cells/mL。建議復蘇的細胞至少培養(yǎng)兩代后再用于其他用途。傳代培養(yǎng)體積建議為15-20 mL（100 mL的培養(yǎng)瓶）或50-60 mL（250 mL 的培養(yǎng)瓶）；
3）將細胞置于37℃，5%CO2，轉速為110-175 rpm的恒溫搖床中進行培養(yǎng)，3-4天傳代次。
細胞轉染在Balance CD 293培養(yǎng)基中，采用商業(yè)化轉染試劑（例如 Gibco 293Fectin™ExpiFectamine™ 293 Transfection Kit ）或 PEI 可以實現對 HEK293 細胞的高效轉染。