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茁彩生物-免疫熒光(單標)
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貨物所在地: 上海上海
更新時間: 2024-12-25 09:40:18
期: 2024年12月25日--2025年12月26日
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產品簡介

免疫熒光(單標),熒光免疫組織化學是現代生物學和醫學中廣泛應用的技術之一,免疫熒光技術與形態學技術相結合發展成免疫熒光細胞(或組織)化學。

詳細介紹

免疫熒光(單標)

免疫熒光(單標)

服務簡介:
熒光免疫組織化學是現代生物學和醫學中廣泛應用的技術之一,免疫熒光技術與形態學技術相結合發展成免疫熒光細胞(或組織)。

冰凍切片免疫熒光實驗步驟

1、 冰凍切片固定冰凍切片從冰箱拿出來復溫,晾干水分,冷丙酮固定10min,待丙酮*干后于PBS(PH7.4中在脫色搖床上晃動洗滌3次,每次5min。

2、 抗原修復:組織切片置于盛滿EDTA抗原修復緩沖液PH8.0)的修復盒中于微波爐內進行抗原修復。5min,此過程中應防止緩沖液過度蒸發,切勿干片。自然冷卻后將玻片置于PBS(PH7.4中在脫色搖床上晃動洗滌3次,每次5min。(修復液和修復強度根據組織來確定)

3、 BSA封閉:切片稍甩干后用組化筆在組織周圍畫圈(防止抗體流走),在圈內滴加3%BSA均勻覆蓋組織,室溫封閉30min

4、 加一抗:輕輕甩掉封閉液,在切片上滴加PBS按一定比例配好的一抗,切片平放于濕盒內4°C孵育過夜。(濕盒內加少量水防止抗體蒸發)

5、 加二抗:玻片置于PBS(PH7.4中在脫色搖床上晃動洗滌3次,每次5min。切片稍甩干后在圈內滴加與一抗相應種屬的二抗覆蓋組織,避光室溫孵育50min

6、 DAPI復染細胞核:玻片置于PBS(PH7.4中在脫色搖床上晃動洗滌3次,每次5min。切片稍甩干后在圈內滴加DAPI染液,避光室溫孵育10min。

7、 封片:玻片置于PBS(PH7.4中在脫色搖床上晃動洗滌3次,每次5min。切片稍甩干后用抗熒光淬滅封片劑封片。

8、 鏡檢拍照:切片于尼康倒置熒光顯微鏡下觀察并采集圖像。(紫外激發波長330-380nm,發射波長420nm;FITC綠光激發波長465-495nm,發射波長515-555 nmCY3紅光激發波長510-560,發射波長590nm

 

石蠟切片免疫熒光實驗步驟

1、 石蠟切片脫蠟至水:依次將切片放入二甲苯Ⅰ15min-二甲苯15min-無水乙醇5min-無水乙醇5min-85%酒精5min-75%酒精5min-蒸餾水洗。

2、 抗原修復:組織切片置于盛滿EDTA抗原修復緩沖液PH9.0)的修復盒中于微波爐內進行抗原修復。中火至沸后斷電間隔10min中低火至沸,此過程中應防止緩沖液過度蒸發,切勿干片。自然冷卻后將玻片置于PBS(PH7.4中在脫色搖床上晃動洗滌3次,每次5min。(修復液和修復條件根據組織來確定)

3、 BSA封閉:切片稍甩干后用組化筆在組織周圍畫圈(防止抗體流走),在圈內滴加3%BSA均勻覆蓋組織,室溫封閉30min。

4、 加一抗:輕輕甩掉封閉液,在切片上滴加PBS按一定比例配好的一抗,切片平放于濕盒內4°C孵育過夜。(濕盒內加少量水防止抗體蒸發)

5、 加二抗:玻片置于PBS(PH7.4中在脫色搖床上晃動洗滌3次,每次5min。切片稍甩干后在圈內滴加與一抗相應種屬的二抗覆蓋組織,避光室溫孵育50min

6、 DAPI復染細胞核:玻片置于PBS(PH7.4中在脫色搖床上晃動洗滌3次,每次5min。切片稍甩干后在圈內滴加DAPI染液,避光室溫孵育10min。

7、 封片:玻片置于PBS(PH7.4中在脫色搖床上晃動洗滌3次,每次5min。切片稍甩干后用抗熒光淬滅封片劑封片。

8、 鏡檢拍照:切片于尼康倒置熒光顯微鏡下觀察并采集圖像。(紫外激發波長330-380nm,發射波長420nm;FITC綠光激發波長465-495nm,發射波長515-555 nm;CY3紅光激發波長510-560,發射波長590nm

 上海茁彩生物科技有限公司,可以承接諸多病理實驗,樣本不僅含有基礎的動物組織切片,還包括植物葉片、動物細胞、骨片、腦片、皮膚等特殊樣本。染色種類多,染色方法全.石蠟染色,冰切染色均可操作,同時還可以承接整體實驗項目,細胞實驗項目,包括樣本的造模,細胞的培養,以及后續細胞的增殖、細胞粘附、細胞劃痕等實驗.

 

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