化工儀器網
技術文章
多巴胺(DA)ELISA試劑盒的應用原理是怎樣的？
閱讀：1276 發布時間：2023-1-9 多巴胺(DA)ELISA試劑盒運用雙抗體夾心ELISA法定量測定其他血清、血漿、組織勻漿、細胞裂解液、細胞培養上清液和其他生物液體中多巴胺(DA)ELISA試劑盒含量。將多巴胺(DA)抗體包被于孔微孔板中，制成固相載體，向微孔中分別加入標準品或標本，其中的多巴胺(DA)與連接于固相載體上的抗體結合，然后加入生物素化的多巴胺(DA)抗體，將未結合的生物素化抗體洗凈后，加入HRP標記的親和素，再次洗滌后加入TMB底物顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成黃色。顏色的深淺和樣品中的多巴胺(DA)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(O.D.值，計算樣品濃度。
多巴胺(DA)ELISA試劑盒是固相夾心法酶聯免疫吸附實驗（ELISA）已知待測物質濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將待測物質和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后，加入親和素標記過的HRP。再經過溫育和洗滌，去除未結合的酶結合物，然后加入底物A、B，和酶結合物同時作用，產生顏色。顏色的深淺和樣品中待測物質的濃度呈比例關系。
多巴胺(DA)ELISA試劑盒使用注意事項：
1、從2-8℃取出的試劑盒,在開啟試劑盒之前要室溫平衡至少30分鐘。酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
2、各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。
3、嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準。
4、為避免交叉污染,要避免重復使用手中的吸頭和封板膜。
5、不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
6、底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。