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Chicken IgY Purification Kit (10 Egg yolks)，產品型號：IGY-1910。
Chicken IgY Purification Kit (10 Egg yolks)，
概述 |
產品 |
雞IgY純化試劑盒（10個蛋黃） |
描述 | 設計用于從雞蛋中快速分離和純化 IgY 的試劑盒。 |
內容 | |
脂質去除緩沖液（試劑 A） | 1 公升 |
IgY 沉淀緩沖液（試劑 B） | 1 公升 |
IgY 重組緩沖液 | 50 毫升 |
IgY 穩定緩沖液 | 50 毫升 |
| 蛋黃分離器 | 1個。 |
儲藏條件
所有試劑在 4oC 下可穩定保存長達 1 年。
一般建議
雞蛋可在 4°C 下長期保存，但建議在使用本試劑盒分離 IgY 之前將雞蛋打碎。分離后的蛋黃可在 4°C 的 0.05% 中儲存數天，而 IgY 回收率不會有任何明顯損失。不應將蛋黃冷凍儲存以用于此試劑盒。
蛋黃中的脂質含量差異很大，有時破損步驟不會產生清澈的上清液。在這種情況下，可以添加更多體積的試劑 A 以破壞蛋黃。
IgY 純化試劑盒 - 如何從蛋黃中純化 IgY 抗體
IGY 的分離和純化步驟很簡單，在室溫下進行。
使用蛋黃分離器將新鮮雞蛋打碎并分離蛋黃。蛋黃被刺破釋放出蛋黃內容物，可以使用牙簽輕松去除膜。
對于新鮮蛋黃，在持續攪拌下加入 5 倍體積的試劑 A 的蛋黃重量。注意：如果蛋黃放置 3 天或以上且未冷凍，建議使用 6 倍體積的試劑 A。不建議使用此試劑盒使用冷凍蛋黃。
加入所有試劑后，會形成濃稠的黃色沉淀。繼續攪拌 10 分鐘，并將內容物在 4 ° C 下孵育過夜。沉淀物將沉淀下來，1-2 小時內可以看到澄清的上清液。
將內容物在冷搖擺式離心機中于 4 ° C以 3500-4000Xg 離心 30 分鐘。
將澄清的上清液倒入預冷的燒杯中，并在不斷攪拌下緩慢加入等體積的試劑 B。繼續攪拌 10 分鐘，并將混合物在 4 ° C 下放置 2-4 小時至過夜。1-2 小時內，底部會出現透明的白色沉淀物。
將內容物在 4°C 下以 4000xg 離心 20 分鐘以收集白色沉淀物。
小心去除所有液體，并使用以下公式在抗體重組緩沖液中重組白色顆粒。對于 10 克蛋黃，添加 2 至 2.5 毫升的抗體重組緩沖液。
通過在 280 處測量 1:20 稀釋的 OD，按內容量化 IgY。
總 IgY 可按 1:1 的比例保存在抗體穩定緩沖液中，可在 -40°C 或以下長期保存。
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