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上海牧榮生物科技有限公司

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genhunter:AP-TAG 試劑盒概述

閱讀:715      發布時間:2024-2-1
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AP-TAG 技術改變了細胞表面受體和配體的檢測和克隆方式。本發明的本質是允許編碼受體的任何分泌性多肽配體或胞外結構域的cDNA序列符合讀碼框地融合至pAPtag克隆載體中的人胎盤分泌性堿性磷酸酶(AP)。所得配體-AP 融合蛋白(稱為 AP-body)在 293T 或 CHO 細胞中表達時,可以高水平分泌到培養基中,因此可以通過 AP 活性測定或使用抗 AP 抗體的蛋白質印跡分析輕松檢測到。因此,配體-AP或可溶性受體-AP融合蛋白可以像抗體一樣充當親和劑,從而可以方便、安全和靈敏地檢測和克隆其相應的細胞表面受體或配體。與傳統的放射性125I標記方法不同,AP-TAG是安全的,不需要配體/可溶性受體純化。

自發明以來,AP-TAG技術已克隆了許多重要的細胞表面受體和配體,包括Leptin、Semaphorin III、Nogo-66、IL-24、Jelly Belly的受體以及Kit、Mek4和Sek受體酪氨酸激酶的配體。

如果您正在使用通過 DD 或其他方法克隆的分泌蛋白或細胞表面分子,AP-TAG 技術可以讓您進一步對這些基因進行功能表征。

AP-TAG Kit B

用于受體/配體相互作用的非放射性檢測。

 

這種單向量系統是第三代AP-TAG技術。分泌型配體或可溶性受體可以與分泌型堿性磷酸酶(AP)在其N端或C端融合以產生“AP體"。所得的 AP 融合蛋白可以作為分泌蛋白表達,并直接用作高度敏感的親和劑,就像抗體一樣。表位標簽(6xHis 和 myc)可以輕松純化、檢測和相互作用測定 (IP) AP 融合蛋白。下面列出了其他改進的功能。

AP-TAG Kit A

用于受體/配體相互作用的非放射性檢測。

 

這是使用 pAPtag-2 和 pAPtag-4 載體的第二代 AP-TAG 技術。分泌型配體或可溶性受體可以與分泌型堿性磷酸酶(AP)在其N端或C端融合以產生“AP體"。所得的 AP 融合蛋白可以作為分泌蛋白表達,并直接用作高度敏感的親和劑,就像抗體一樣。


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