改良油紅O染色液

產(chǎn)品簡介:

脂質(zhì)(Lipid)是中性脂肪、類脂及其衍生物的總稱，其共同的物理特性是不溶于水，易溶于有機(jī)溶劑(如乙醇等)。人體的脂肪主要有兩種:1、儲存脂肪，如中性脂肪，主要分布于皮下、腎、胰腺等部位;2、結(jié)構(gòu)脂肪，如類脂(磷脂、糖脂、膽固醇等)，主要分布于細(xì)胞內(nèi)，中性脂肪(Neutral fat)是由三分子脂肪酸和一分子甘油組成的脂類，呈中性，中性脂肪是儲存能量的方式之一，在氧化時(shí)釋放出能量。中性脂肪染色經(jīng)常采用蘇丹工、蘇丹血、蘇丹IV、蘇丹黑 B、油紅0 法等，傳統(tǒng)方法采用蘇丹染料，最近發(fā)現(xiàn)偶氮染料油紅0 更適合脂肪的染色;油紅 0 是很強(qiáng)的脂溶劑和染脂劑，較易與甘油三脂結(jié)合呈小脂滴狀與磷脂結(jié)合力稍差，其染色原理一般認(rèn)為是物理上的溶液作用或吸附作用，借溶液作用使脂肪染色，染料在冰凍切片內(nèi)脂質(zhì)的溶解度較原溶劑中的溶解度更大，所以在染色時(shí)染料就從有機(jī)溶劑轉(zhuǎn)移入脂質(zhì)而使脂肪染色。改良油紅 0染色液主要用于顯示組織器官的脂肪變性和類脂質(zhì)的異常沉著，常發(fā)生于肝、腎、心等實(shí)質(zhì)臟器的脂肪變性，細(xì)胞內(nèi)出現(xiàn)多數(shù)中性脂肪滴;鑒別和診斷脂肪組織中所發(fā)牛的腫瘤及其性質(zhì)，脂肪的陽性染色結(jié)果呈黃至紅色，但具體顏色因脂質(zhì)濃度而定。該試劑僅用于科研領(lǐng)域，不適用于臨床診斷或其他用途。

自備材料:

1、60%異丙醇、蒸餾水、甘油明膠或阿拉伯糖膠

操作步驟(僅供參考):

1、 冰凍切片厚度 6~10um，不固定或 10%福爾馬林固定 10min 后水洗，蒸餾水稍沖洗

2、 入 60%異丙醇浸洗 20~30s。

3、入改良油紅 0 染色液(加蓋)，密閉染色 10~15min。

4、入 60%異丙醇稍洗以便去除染液，蒸餾水稍微清洗。

5、入 蘇木素染色液復(fù)染2~5min。

6、自來水漂洗 10min 至核為藍(lán)色。

7、蒸餾水稍微清洗，濾紙吸干周圍水分

8、水溶性封固劑(甘油明膠或阿拉伯糖膠)封固，鏡檢。

染色結(jié)果：

中性脂肪：橙紅色或橘紅色，細(xì)胞核：藍(lán)色

注意事項(xiàng):

1、由于脂肪易溶于有機(jī)溶劑，組織不能采用含有機(jī)溶劑的固定液(如需要固定可采用 10%福爾馬林)，亦不采用石蠟切片，需用冰凍切片或碳蠟切片。

2、作脂肪染色的冰凍切片不可太薄，過薄的切片常會使脂質(zhì)丟失。

3.、油紅 0染色工作液不穩(wěn)定，易產(chǎn)生沉淀，影響染色觀察，可按需配制后采用靜置20~40min 或 3000rpm 離心 10 分鐘取上清備用。

4、如果 60%的異丙醇不易獲得，亦可采用 70%的乙醇。

5、蘇木素染色液復(fù)染時(shí)間不能過長。

6、染色結(jié)果不能長久保存，應(yīng)盡快觀察及照相。

7、水溶性封固劑封固的樣本，保存時(shí)間不長;如需長期保存，可以在蓋玻片與載玻片交界的邊緣用中性樹膠封閉。

8、試劑開封后請盡快使用，以防影響后續(xù)實(shí)驗(yàn)效果。

有效期：12個月有效;常溫運(yùn)輸，按要求保存。