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上海惠誠生物科技有限公司
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瓊脂糖預染預制膠電泳試劑盒使用中可能出現的問題上海惠誠生物專業解答

時間:2022/5/30閱讀:386
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瓊脂糖預染預制膠電泳試劑盒使用過程中可能出現一些問題,比如:如何選擇預制膠濃度,選擇什么體系,Marker條帶電泳清晰但樣品電泳很差,回收低,掛孔和圖像不好等原因,惠誠生物針對推出的該款預制膠進行解答。

 

1、如何選擇預制膠濃度?

不同分子量對應的預制膠濃度,實驗情況很復雜,下表僅供參考:

圖片

2、能不能使用其他體系?

目前這款預制膠使用體系為TAE,不能在其他體系(如TBE/TPE)的電泳液中電泳;

 

3、Marker條帶電泳清晰,樣品電泳很差?

一般情況是樣本的問題,因為膠只是一個平臺,不改變核酸的結構和形態,具體解決方案如下:

A、調整電壓(一般降低);B、減少上樣量或者稀釋;C、用新的制備樣品;D、調整PCR 的條件(如退火溫度)等等。

 

4、為什么回收低?

若回收低,需要調高熔膠溫度和延長熔膠時間,具體原因如下:

A、膠是0.7cm 厚的標準膠,比用戶自配的膠在切膠的位置厚很多,因此在切膠的過程中切的膠要比自配的膠多;

B、膠孔比用戶原來自己的孔寬一點點,用戶在切膠的過程中也會比自配的膠切的多。

這樣的話,用戶使用他們原來的習慣,在相同的時間膠沒有*熔掉,回收量就會少很多。

 

5、出現掛孔的原因?

用戶在電泳液外面點樣,樣品因為沒有電泳液保護,會很快擴散到膠里,有可能形成掛孔。

 

6、圖形不好怎么辦?

預制膠因為在低溫時間長,電泳時較好比客戶經常使用的電壓低一些,調低20-40伏特左右,會得到比較好的圖形。

 

7、電泳是一個系統,任何原料都可能引起變化,任何改變也需要調整。根據實際需求,選擇*優方案。

 

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