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中級(jí)會(huì)員 | 第7年

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核酸電泳實(shí)驗(yàn)過(guò)程中如何制膠

時(shí)間:2022/10/13閱讀:3198
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電泳定義:帶電顆粒子在電場(chǎng)作用下,向著與其電性相反的電極移動(dòng),稱為電泳(electrophoresis, EP),在確定的條件下,帶電粒子在單位電場(chǎng)強(qiáng)度作用下,單位時(shí)間內(nèi)移動(dòng)的距離(遷移率)為固定值。不同帶電粒子因所帶電荷不同,或所帶電荷相同但荷質(zhì)比不同,在同一電場(chǎng)中電泳,經(jīng)一定時(shí)間后,由于移動(dòng)距離不同而相互分離。分開(kāi)的距離與外加電場(chǎng)的電壓與電泳時(shí)間成正比。利用帶電粒子在電場(chǎng)中移動(dòng)速度不同而達(dá)到分離的技術(shù)稱為電泳技術(shù)。
電泳的應(yīng)用:電泳設(shè)備簡(jiǎn)單,操作方便,具有高分辨率及選擇性特點(diǎn),已日益廣泛地應(yīng)用于分析化學(xué)、生物化學(xué)、臨床化學(xué)、毒劑學(xué)、藥理學(xué)、免疫學(xué)、微生物學(xué)、食品化學(xué)等各個(gè)領(lǐng)域 。
核酸電泳實(shí)驗(yàn)過(guò)程 :
制膠: 
1、制備配膠液:5分鐘 
2、稱量瓊脂糖:3-5分鐘 
3、微波爐融化:10-15分鐘 
4、溶液冷卻至60度:8-10分鐘 
5、倒膠冷卻:30-40分鐘 
6、清洗設(shè)備:5分鐘
瓊脂糖凝膠電泳是用瓊脂或瓊脂糖作支持介質(zhì)的一種電泳方法。對(duì)于分子量較大的樣品,如大分子核酸、病毒等,一般可采用孔徑較大的瓊脂糖凝 膠進(jìn)行電泳分離。
注意事項(xiàng):
1、技術(shù)工業(yè)生產(chǎn),預(yù)制膠濃度非常準(zhǔn)確,但比實(shí)際客戶自配濃度低(微波爐加熱失水過(guò)多等),需要客戶測(cè)試選用合適的濃度產(chǎn)品。
2、體系為TAE,跟客戶自配的TAE兼容,可以直接使用,建議換成Mydeer包裝的TAE電泳液。不能在TBE或其他體系類電泳液中使用。
3、電壓為客戶之前使用TAE瓊脂糖膠的電壓,或者微調(diào)整一下。

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