色譜柱的預防
影響色譜柱運用的要素
不同基質的填料具有不同的pH適用范圍。其實,在作業過程中大多數的顆粒物堵塞導致的色譜柱背壓升高問題是體現在柱頭堵塞。當活動相pH超出堿性范圍時,會加速硅膠的溶解而釋放出絮狀物堵塞柱子;當活動相pH值超出酸性范圍時,鍵合相易發生水解而流失,這兩種反應均是不行逆反應,特別是在溫度較高(>40℃)的環境下,會使柱效敏捷下降而報廢。
當前運用為廣泛的是硅基鍵合相填料,當以水溶液作為活動相或活動相中含有一定濃度的磷酸鹽緩沖液時,水溶液中或緩沖鹽溶液中會滋生出一些細菌或霉菌,從而堵塞固定相顆粒間的空地。特別是關于多元自動份額混合的液相色譜儀來說,水相或緩沖鹽相獨立存貯,因寄存時刻較長而簡略發生此類問題。
現在,廣泛運用的填料顆粒粒徑范圍在3~10μm,孔徑在6~10nm,色譜柱在運用中會有大量的活動相經過,如活動相含有微量不溶性雜質顆粒,則很簡略在柱頭部位被截留,久而久之,形成色譜柱機械性堵塞,引起柱壓升高而無法正常運用。
影響色譜柱壽命的要素許多,除活動相和樣品要素外,還有其它一些外在要素,如,柱壓的影響,溫度的影響,色譜柱的正確沖刷,色譜柱的正確裝置等。
防備措施
為了下降色譜柱的損害問題,大家在運用色譜柱時能夠做一些防備。例如:
在線過濾器的內部顆粒空地一般是0.5微米,關于UHPLC會挑選0.2微米空地的在線過濾器。這個空地尺度和柱頭的過濾篩板尺度挨近或許略小。
維護柱有許多種,通用型、一體式、卡套式,可是它其實是一個和剖析柱固定相相同的10-20mm的小柱子。
有一些液相的剖析方法沒有明確標注樣品的凈化,但期望大家在做剖析時都能夠考慮樣品的凈化,常用的方案是對樣品進行過濾。
保存
1、短期保存
2、長期保存
將色譜柱按照說明書保存在對應的溶劑中,而且將色譜柱從體系中去下,兩端用堵頭密封。