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miRNA熒光定量檢測服務主要基于實時熒光定量PCR(qPCR)技術。這種技術通過在PCR反應體系中加入熒光標記物，利用熒光信號積累實時監測整個PCR進程。在miRNA的檢測過程中，首先將miRNA逆轉錄為cDNA，然后通過PCR反應擴增miRNA的序列。在此過程中，miRNA與標記有熒光探針的引物結合，通過熒光信號的監測，實現對miRNA數量的定量分析。
應用范圍
基礎生物學研究：用于研究miRNA在生物體內的表達模式、調控機制及其對細胞功能的影響。
疾病診斷與預后：miRNA表達譜與多種疾病狀態相關，包括癌癥、心血管疾病、神經系統疾病等。通過熒光定量檢測miRNA，有助于疾病的早期診斷、預后判斷及治療效果監測。
藥物研發：評估藥物對miRNA表達的影響，為新藥開發提供分子標志物和潛在治療靶點。
步驟
RNA提取：使用專用的RNA提取試劑盒從細胞或組織樣本中提取miRNA。
miRNA逆轉錄：利用逆轉錄試劑盒將提取的miRNA逆轉錄為cDNA。
qPCR擴增：使用特異的miRNA引物和熒光探針進行PCR擴增，同時監測熒光信號的變化。
數據分析：根據熒光信號的強度和變化，計算miRNA的表達量，并進行統計分析。
分析方法
相對定量法：通過比較目標miRNA與內參基因(如U6或RNU48)的表達量，確定目標miRNA的相對表達水平。這種方法適用于比較不同樣本間miRNA的表達差異。
絕對定量法：使用已知濃度的標準品制作標準曲線，根據樣本的熒光信號強度計算miRNA的絕對數量。這種方法能夠提供更精確的miRNA表達量信息。
miRNA熒光定量檢測服務是一種高效、準確的miRNA分析方法，廣泛應用于基礎生物學研究、疾病診斷和藥物研發等領域。通過熒光信號的實時監測和定量分析，能夠深入了解miRNA在生物體內的功能和調控機制，為相關研究和應用提供有力支持。
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