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上海淳麥生物科技有限公司

JM110感受態細胞說明書

時間:2019-10-7閱讀:858
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JM110感受態細胞

JM110 Chemically Competent Cell
產品規格:

JM110 
pUC19control vector10pg/μl       10μl

JM110感受態細胞基因型:
rpsL (Str R) thr leu thi-1 lacY galK galT ara tonA tsx dam dcm supE44 Δ(lac-proAB) /F′ [traD36 proAB lacIqlacZΔM15]
JM110感受態細胞簡要說明:
CMbio JM110菌株具有硫酸鏈霉素抗性(StrR) ;是甲基化基因dam、dcm 缺失的菌株,提取得到的質粒DNA,可被對damdcm甲基化敏感的內切酶切割; lacIqlacZΔM15的存在使JM110可以進行藍白斑篩選,但轉化效率不高,CMbio High5TM系列JM110感受態細胞經特殊工藝制作,經pUC19 質粒檢測轉化效率約107 cfu/μg。一般不用于質粒構建,只適用于質粒轉化。
JM110感受態細胞操作說明:
1、CMbio JM110感受態細胞放置冰中融化(或放手心或室溫片刻,待菌體處于冰水混合狀態時迅速插入冰中),加入目的DNA并用手EP管底輕輕混勻,冰上靜置25分鐘。
242℃水浴熱激45秒,迅速放回冰上并靜置2分鐘,晃動會降低轉化效率。

  1.  向離心管中加入700μl不含抗生素的無菌培養基(2YTLB),混勻后37℃,200 rpm復蘇60分鐘。

4. 5000rpm離心一分鐘收菌,留取100μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的2YTLB培養基上。
5. 將平板倒置放于37℃培養箱過夜培養。
JM110感受態細胞注意事項:

  1. CMbio  感受態細胞在冰上融化。
  2.  混入質粒時應輕柔操作。

3. 轉化高濃度的質粒可相應減少終用于涂板的菌量。

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