產品規格（CAT#: DL1020）

JM109：                                                     100μl/支

pUC19 (control vector，10pg/μl):                   10μl

保存條件(保質期)：                            -80℃（6個月） 

基因型

endA1 recA1 gyrA96 thi-1 hsdR17 (r_k^-,m_k⁺) relA1 supE44 D (lac-proAB) [F′traD36 proAB laqI ^qZΔM15]

產品說明

JM109菌株來源于E.coli K strain，是提取高質量DNA的理想菌株，recA1和endA1的突變有利于克隆DNA的穩定和高純度質粒DNA的提取。攜帶hsdR17基因型背景，使得異源DNA不被內源核酸酶系統降解。laqI ^qZΔM15的存在使JM109可用于構建克隆，藍白斑篩選實驗；JM109感受態細胞經特殊工藝制作，pUC19質粒檢測轉化效率可達10⁹cfu/μg DNA。 

操作方法

1. JM109感受態細胞從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA (質粒或連接產物) 并用手EP管底輕輕混勻 (避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。

2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰中并靜置2分鐘，晃動會降低轉化效率。

3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養基 (2YT或LB)，混勻后37℃，200 rpm復蘇60分鐘。

4. 5000 rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的2YT或LB培養基上。

5. 將平板倒置放于37℃培養箱過夜培養。

注意事項

1. 感受態細胞在冰中緩慢融化，插入冰中8分鐘內加入目標DNA，不可在冰中放置時間過長，長時間存放會降低轉化效率。

2. 混入質?；蜻B接產物時應輕柔操作。

3. 轉化高濃度的質粒或率的連接產物可相應減少終用于涂板的菌量

上海淳麥生物科技有限公司 4006815880