產品簡介

  大腸桿菌經Ca離子處理后可攝取外源DNA（Plasmid、Phage DNA），處于這種狀態的細胞稱作感受態細胞（Competent Cells）。在進行基因重組實驗時，使用感受態細胞的轉化實驗應用十分廣泛。制作基因文庫、重組質粒體以及進行亞克隆實驗時，特別是在目的基因含量十分低的情況時，使用的感受態細胞十分重要。本公司生產的感受態細胞是采用大腸桿菌經特殊工藝處理得到的感受態細胞，長期以來備受廣大客戶的喜愛，可用于DNA的化學轉化。使用pUC57質粒檢測，轉化效率可達107～108，在-70℃下保存幾個月轉化效率不發生改變。

使用方法

  1.將100μl感受態細胞于冰上解凍。應注意所用DNA體積不要超過感受態細胞懸液體積的十分之一。

  2.取5μl連接產物加入到感受態細胞中，輕輕旋轉幾次以混勻內容物。在冰上放置30min。

  3.將管放入預加溫到42℃的水浴中，熱激90秒。快速將管轉移到冰浴中，使細胞冷卻2～3min。該過程不要搖動離心管。

  4.每管中加900μl LB(SOC)培養基(不含抗生素)，37℃振蕩培養1h。目的是使質粒上相關的抗性標記基因表達，使菌體復蘇。

  5.室溫4,000rpm離心5min，棄去900μl上清后，用剩余100μl培養基重懸細胞并涂布到含相應抗性的LB瓊脂平板或含X-gal、IPTG、相應抗性的LB瓊脂平板表面。注意：細胞用量應根據連接效率和感受態細胞的效率進行調整。

  6.將平板置于室溫直至液體被吸收。

  7.倒置平皿，于37℃培養，12～16h后可出現菌落。

儲存條件
  -70℃凍存

注意事項

  1.感受態應保存在-70℃，不可多次凍融和放置時間過長，以避免降低感受態細胞的轉化效率。

  2.進行轉化操作時，應根據相應溫度及無菌條件的要求進行。

  3.為防止轉化實驗不成功，可以保留部分連接反應液，以重新轉化，將損失降到低。

上海淳麥生物科技有限公司終解釋