DiI-Ac-LDL DiI標(biāo)記乙酰化低密度脂蛋白

• 英文名稱 : DiI-Ac-LDL
• 儲(chǔ)存條件 : 2-8℃避光保存，請(qǐng)勿冷凍
• 純度 : 98%
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DiI-Ac-LDL DiI標(biāo)記乙酰化低密度脂蛋白

DiI-Ac-LDL，即1,1’-雙十八酯基-3,3,3,,3,四甲基-吲哚碳菁高氯酸鹽標(biāo)記的乙酰化低密度脂蛋白。它能用于鑒定和分離混合細(xì)胞群中的血管內(nèi)皮細(xì)胞和巨噬細(xì)胞。當(dāng)細(xì)胞被DiI-Ac-LDL標(biāo)記后，脂蛋白就會(huì)被溶酶體酶降解并且DiI（熒光探針）會(huì)積累在細(xì)胞內(nèi)膜中。標(biāo)記了DiI-Ac-LDL的細(xì)胞生存活性不受影響。血管內(nèi)皮細(xì)胞純化培養(yǎng)物可以基于增加的代謝DiI-Ac-LDL利用熒光激活分類從復(fù)雜的初級(jí)培養(yǎng)物中進(jìn)行分離。污染細(xì)胞（成纖維細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞、周細(xì)胞、上皮細(xì)胞）將不會(huì)被標(biāo)記。巨噬細(xì)胞能夠從混合的細(xì)胞群中（包括血管內(nèi)壁細(xì)胞）區(qū)分出來是因?yàn)樗臉?biāo)記更亮一些。

      標(biāo)記有DiI-Ac-LDL的內(nèi)皮細(xì)胞較其它抗原標(biāo)記的內(nèi)皮細(xì)胞有較多的優(yōu)勢(shì)。一旦細(xì)胞被標(biāo)記， 熒光探針(DiI)將不會(huì)被胰蛋白酶移除掉。低密度和匯合培養(yǎng)的血管內(nèi)皮細(xì)胞都將被高效的標(biāo)記。其它類型的細(xì)胞標(biāo)記水平均達(dá)不到血管內(nèi)皮細(xì)胞標(biāo)記（除了巨噬細(xì)胞）。索萊寶公司DiI-Ac-LDL均通過牛主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞和小鼠巨噬細(xì)胞進(jìn)行標(biāo)記測(cè)驗(yàn)以確保結(jié)果的*性。

實(shí)驗(yàn)步驟：

      1. 在生長(zhǎng)培養(yǎng)基中將DiI-Ac-LDL稀釋至20-50ug/ml；

      2. 將其加入到細(xì)胞中37 ºC溫育4小時(shí)；

      3. 去掉培養(yǎng)基；

      4. 用無探針的緩沖液沖洗；

      5. 通過熒光顯微鏡觀察并/或者將細(xì)胞通過胰蛋白酶（或者EDTA）進(jìn)行分類。

      6. 熒光顯微鏡：用標(biāo)準(zhǔn)羅丹明激發(fā)進(jìn)行觀察 （或者建議用波長(zhǎng)激發(fā)：549nm、發(fā)射：565nm）。如果需要，用3%甲醛在PBS中固定。切勿使用甲醇或丙酮進(jìn)行固定，因?yàn)镈iI溶于有機(jī)溶劑。（僅供科研使用）

注意事項(xiàng)：

      長(zhǎng)時(shí)間的儲(chǔ)存后可能會(huì)產(chǎn)生沉淀，這種現(xiàn)象屬于正常情況。溶液放入離心管中離心2分鐘將沉淀除去即可。DiI-Ac-LDL不穩(wěn)定，實(shí)驗(yàn)時(shí)hao現(xiàn)用現(xiàn)配，采用新鮮配置工作液。