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重組人BMP4的分泌表達優點

2021-9-7  閱讀(732)

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  重組人BMP4蛋白分為凍干粉和溶液態兩種保存形式,原核細胞表達的重組蛋白為凍干粉狀態,真核細胞表達的重組蛋白為溶液態保存,這樣使得重組蛋白非常穩定,在零下八十℃條件下可保存數年。凍干粉在使用前需進行溶解,其中溶解的方法非常關鍵,因為溶解不好會降低蛋白的效用。溶液態保存的重組蛋白在凍融稀釋使用過程中也需要仔細注意。
  重組人BMP4蛋白真核表達與原核表達如何選擇:
  真核表達:常用酵母、昆蟲、動物和哺乳動物細胞。其優點是根據原核生物蛋白與靶DNA的高度特異性相互作用而設計,不存在基因的非特異性激活或抑制。它可以誘導高達105倍的高效基因表達??梢試栏窨刂苹虮磉_。
  原核表達:它的優點是可以在短時間內獲得基因表達產物,而且成本相對較低。方法也簡單,可以表達的蛋白質也很多。但缺點是表達的蛋白質沒有經過修飾,不一定具有天然活性,表達系統不能調節表達時間和表達水平。一些基因的持續表達會對宿主細胞產生毒性作用,過度表達可能導致非生理反應。目前,蛋白質往往以包涵體的形式表達,這也導致了產品純化的困難??捎糜诳贵w制備或檢測,但應避免功能試驗。
  重組人BMP4的分泌表達優點:
  1、一些可被細胞內蛋白酶所降解的蛋白質分泌到周質或培養基中可增加其穩定性;
  2、有些在細胞內表達時無活性的蛋白分泌表達時能夠按適當的方式進行準確折疊,增加到蛋白的活性;
  3、由于蛋白質信號肽和編碼序列間被切割,所以分泌蛋白產物不含氨基酸起始密碼子 ATG 所編碼的甲硫氨酸,而甲硫氨酸會影響許多蛋白的活性。

重組人BMP4

 

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