轉(zhuǎn)印儀使用簡便,操作快捷，“1小時(shí)即可完成“

時(shí)間：2019/12/27閱讀：1269

　　轉(zhuǎn)印儀為從組織培養(yǎng)細(xì)胞制備純化完整RNA提供了一種快速而簡便的技術(shù)；1小時(shí)內(nèi)總RNA可通過兩塊96孔ScreenPlate得以提純；在純化過程中無需苯酚或乙醇沉淀，終RNA制備過程中無可檢測的DNA酶污染。

　　轉(zhuǎn)印儀使用簡便,操作快捷，1小時(shí)即可完成

　　1、插上半干轉(zhuǎn)印儀的電源，打開儀器開關(guān)，用雙手按住儀器兩段的上面的按鈕，手指向上抬，拿下半干轉(zhuǎn)印儀上面的陽極電極板。

　　2、Tris/甘氨酸-SDS-PAGE結(jié)束后，取出凝膠，在Tris/甘氨酸緩沖液中漂洗數(shù)秒。取凝膠方法：用刀片將兩玻璃板分開，將多余的凝膠劃去，上部以濃縮膠為準(zhǔn)全部棄去，下部以分子量標(biāo)準(zhǔn)小分子帶下一點(diǎn)全部劃去，取一10ml注射器注滿轉(zhuǎn)印緩沖液，插入玻璃板與凝膠之間注水，使水的壓力將兩者自然分開,邊推邊進(jìn),反復(fù)多次注水,直至凝膠從玻璃板上滑落下來。

　　3、將NC膜和濾紙切出與凝膠一樣大小，置轉(zhuǎn)移緩沖液中濕潤5-10min、

　　4、按照以下順序放置濾紙，凝膠和NC膜到半干槽中。

　　5、每層之間的氣泡要全部去除。可以用10ml吸管輕輕在上一層滾動(dòng)去除氣泡，然后用*緣的塑料片中間挖空與凝膠一樣大小或略小一點(diǎn)，以防電流直接從沒有凝膠處通過造成短路，蓋好加上陽極電極板。

　　6、按下set鍵，設(shè)置轉(zhuǎn)印的時(shí)間及電壓，確定后儀器開始運(yùn)行。

　　7、轉(zhuǎn)膜結(jié)束后，將膜取下封閉，關(guān)掉電源開關(guān)，拔下電源，并清潔半干轉(zhuǎn)印儀。

　　注意在操作過程中要按照電源線顏色將電泳儀插在電泳儀上，否則蛋白印跡不會(huì)被轉(zhuǎn)到NV膜或是PVDF膜上。

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