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PCR技術已應用到生物制藥領域的各個環節從前期研發階段后選序列的篩選，到工藝開發環節穩健方法的建立，至生產放行的把控。每一個環節都需要倚仗PCR技術的結果作為衡量的依據。諸如支原體，宿主DNA，內外源性病毒，逆轉錄病毒等風險因子都要求在生產起始、中間過程和終產品階段，進行定性或定量PCR分析，以確保風險因子可控。對CART，TCRT，CAR-NK等細胞治療產品而言，CAR/TCR基因拷貝數，RCR/RCL復制型慢病毒檢測,轉染效率等也都是必需的PCR檢測項目。
PCR體系構建中經常遇到的問題
一個樣品多項目檢測，體系構建相當復雜（多引物、探針、酶、dNTP、模板和Mg2+，緩沖液）在過程中易出現加樣錯誤；
操作繁瑣但定量結果判定又很嚴：標曲R2大于0.98，擴增效率介于90-110，低標準點Ct不高于39。一旦結果不達標，又消耗人力重新開展實驗；
RCL檢測出現假陽性，無模板的陰性對照（No Template Control，簡稱 NTC）NTC也由于污染造成假陽性；
每日樣品及樣品量不一樣，需要跟進樣品量調整孔板加樣的位置；
由于沒有數據追蹤，結果失敗卻很難排查錯誤原因；
不同實驗員不同時間重復性差。
如圖所示，CART免疫產品質控中，定量PCR構建體系。（放大）
所以大家都在尋找一個極易上手、高效快速構建各類高精度反應體系，且能標準化的試驗結果。珀金埃爾默（PerkinElmer）公司推出的新一代JANUS G3 自動化PCR體系構建工作站就是一個不錯的解決方案?？蓾M足的應用包括DNA/RNA的提取、純化；DNA/RNA 濃度均一化；PCR 和測序產物純化；PCR 反應板的建立(PCR, RT-PCR, Real Time PCR)等相關實驗。
JANUS G3自動化PCR體系構建工作站 （放大）
JANUS G3自動化PCR體系構建工作站以其穩固的性能，靈活的配置，簡便人性化軟件操作，正在逐步瓦解諸多手工操作遇到的難題。
JANUS G3 PCR體系工作站特質
一、消除實驗誤差，提高實驗精度，重復性好
在PCR和qPCR加樣過程中，尤其在配置96孔或者384孔反應板時，采用高通量高精度的自動化PCR構建體系，可以避免在高壓工作下人工疲勞操作帶來的不均一性，減小實驗誤差，并提高樣本處理效率。
1. JANUS G3自動化PCR體系構建工作站具有AccuSense液面感應技術，每通道獨立移液器均可以的進行液面探測，吸頭總是接觸液面下1-3mm，確保能吸到樣品，同時盡量避免液體吸附到吸頭外側臂；確保的移液精度，減少樣品吸附殘留。兼容的電離液和非電離液，包括有機溶液（如DMSO，甲醇）。減少交叉污染，確保數據完整性。
固定鋼針或者吸頭可探測或追蹤液面位置 （放大）
如圖一所示：微量體積移液時，在不同移液體積下，CV值的波動極小，重復性佳。
圖一：微量體積移液的重復性和穩定性 （放大）
如圖二所示：大體積移液時，性均大于99%，CV波動性更小。自動化PCR體系構建工作站移液范圍是0.5ul-5000ul。
圖二：大體積移液的重復性和性 （放大）
2. 基于系統液的液相驅動移液技術，一方面確保高精度移液，另一方面也避免了氣溶膠的污染（因可用系統液對整個液體管道和一次性吸頭適配器進行清洗）。在大部分的案例中，都能避免使用昂貴的帶濾芯的吸頭，而只用正常的標準吸頭。
二、靈活性突出，適用于復雜多變的應用場景
1. 移液分液靈活選擇
Varispan具有4通道或者8通道移液臂，可獨立探測液面并在Z軸獨立運動。各通道移液器之間的間距可自動調整，可操作試管、微孔板、深孔板和試劑瓶。同一移液臂，可進行靈活的多通道移液，提高了工作效率。以8通道移液臂為例，進行96 PCR板體系構建，只需不到10分鐘，即可快速完成實驗。相比手工操作，實驗通量更高，也避免加樣錯誤的發生。
2. 可整合和擴展性
移板機械臂可同時整合循環擴增儀。微孔板放入、移出循環儀、微孔板移動到振蕩器、冷熱溫控、離心機等都可以實現自動化。
三、簡便易用且功能強大的操作軟件WinPREP
1. 預定義的實驗器具，簡化了實驗程序的建立；具有用戶使用向導，可指導用戶收集相關實驗器具和試劑及位置擺放，儀器維護等。減少客戶對自動化的恐懼，實驗過程能被快速啟動和運行。節省更多的時間，確保實驗順利運行，獲得更好地實驗數據和穩定性，這對于新的用戶尤其重要。
2. WinPREP 軟件具備調用應用程序、追蹤樣品制備過程，以及整合輔助設備的能力，以實現全自動化應用解決方案，滿足樣品在處理過程中的可追溯，可記錄。
3. 符合 21 CFR Part 11 相關法規規范，只有授權用戶才可以訪問設備，數據從生成的那一刻起自動保護，滿足數據安全性和溯源性要求。
兩個型號供您選擇
JANUS G3 自動化PCR體系構建工作站實現靈活的無人看守的PCR反應建立, 減少技術人員的動手時間，減少人為錯誤，提高實驗穩定性和重復性；同時也大大提高了工作通量和質量。相信在不久的將來，JANUS G3 自動化PCR體系構建工作站能夠在越來越多的應用中釋放能量，助力整個生物制藥產業逐步邁向自動化的進程。
