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Bio-Techne
中級會(huì)員 | 第7年

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單細(xì)胞分離的方法和技術(shù)亮點(diǎn)介紹

時(shí)間:2022/9/9閱讀:1109
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  單細(xì)胞分離提取系統(tǒng)用于各種類型的單細(xì)胞分離培養(yǎng)、純化、檢測;獲得單克隆細(xì)胞;用于單細(xì)胞基因擴(kuò)增,用于單細(xì)胞測序等。
  一、單細(xì)胞的分離方法:
  1.機(jī)械法
  首先輕輕地研碎葉片組織,然后再通過過濾以及離心純化細(xì)胞。相比于酶解法,機(jī)械法對細(xì)胞進(jìn)行分離有如下2個(gè)特點(diǎn),分別是質(zhì)壁分離的情況不會(huì)發(fā)生與不會(huì)有酶對細(xì)胞造成傷害。
  2.酶解法
  利用果膠酶對植物的葉片進(jìn)行處理,使得細(xì)胞間的中膠層發(fā)生降解,從而使具有代謝活性的細(xì)胞被分離出來。用來分離細(xì)胞的果膠酶不但可以使中膠層發(fā)生降解,還可以使細(xì)胞壁軟化。所以在使用酶解法對細(xì)胞分離時(shí),為了避免細(xì)胞脹裂,必須對酶溶液給予滲透壓保護(hù)。
  二、技術(shù)亮點(diǎn):
  1.單細(xì)胞的證據(jù)可追溯性
  在分離細(xì)胞前后的過程中,會(huì)連續(xù)拍取多張細(xì)胞圖片,證實(shí)克隆來自于單個(gè)細(xì)胞,這些圖片會(huì)根據(jù)孔板的位置進(jìn)行命名,并存儲(chǔ)在硬盤中,以便追蹤。
  2.單細(xì)胞打印效率高,且適用于多個(gè)細(xì)胞系
  分離快速,一個(gè)96孔板只需2-3min,且每個(gè)孔都有多張圖片證實(shí)為單細(xì)胞,該技術(shù)已經(jīng)應(yīng)用于在多種細(xì)胞的單細(xì)胞分離。
  3.細(xì)胞無損傷,單細(xì)胞存活率高
  細(xì)胞無需標(biāo)記染色,沒有激光損傷,沒有電壓的影響,直接進(jìn)行分離,所以細(xì)胞沒有任何損傷,分離后的細(xì)胞存活率高,克隆恢復(fù)率高。

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