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高效液相色譜法的局限性有哪些

閱讀:2681      發(fā)布時間:2022-6-23
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高效液相色譜儀(HPLC)是應(yīng)用高效液相色譜原理,主要用于分析高沸點不易揮發(fā)的、受熱不穩(wěn)定的和分子量大的有機化合物的儀器設(shè)備。它由儲液器、泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀等幾部分組成。
儲液器中的流動相被高壓泵打入檢測系統(tǒng),樣品溶液經(jīng)進(jìn)樣器進(jìn)入流動相,被流動相載入色譜柱(固定相)內(nèi),由于樣本溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數(shù),在兩相中作相對運動時,經(jīng)過反復(fù)多次的“吸附-解吸”的分配過程,各組分在移動速度上產(chǎn)生較大的差別,被分離成單個組分依次從柱內(nèi)流出,通過檢測器時,樣本濃度被轉(zhuǎn)換成電信號傳送到記錄儀,數(shù)據(jù)以圖譜形式輸出檢測結(jié)果。
高效液相色譜儀方便易用的流量和壓力校正功能,確保儀器的高精度和穩(wěn)定性;采用靜態(tài)電機控制電路,實現(xiàn)電機控制信號的自動反饋跟蹤功能,有效提高電機控制精度,確保了泵的可靠性及穩(wěn)定性;通用樣品池設(shè)計,微量與常量池之間更換方便。
高效液相色譜法適于分析沸點高、相對分子質(zhì)量大,受熱易分解的不穩(wěn)定有機化合物、生物活性物質(zhì)以及多種天然產(chǎn)物。局限性:
1.離效液相色譜法中需使用多種溶劑,其成本比氣相色譜法髙,且易引起環(huán)境污染;當(dāng)進(jìn)行梯度淋洗時,操作比氣相色譜的程序升溫操作復(fù)雜。
2.高效液相色譜法中缺少像氣相色譜法中使用的熱導(dǎo)池檢測器,氫火焰離子化檢測器那樣的通用型檢測器。
3.髙效液相色譜法不能替代氣相色譜法去完成要求柱效達(dá)10萬塊理論塔板數(shù)以上的,組成復(fù)雜的石油樣品分析。也不能替代中、常壓柱色譜法去分析受壓易分解、變性的生物活性樣品。

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