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技術文章

實驗室樣品收集及培養基滅菌使用

閱讀:168          發布時間:2024-7-1

樣品的采集及檢測:

一、保證采樣器具的無菌性
1.玻璃器皿:采用干熱滅菌方式進行滅菌,保證恒溫、時間足夠(但不可時間過長,導致玻璃器皿易裂紋而報廢)。
2.取樣筐:使用前要用 75%酒精進行噴灑消毒
3.取樣勺、濃奶取樣提子:要保證其清潔消毒,清潔后用 75%酒精進行擦拭消毒。
4.取樣袋:可現用酒精進行擦拭消毒,再在超凈臺用紫外燈照射消毒,(包裝車間要在傳遞窗用紫外燈照射消毒)。
5.電子稱表面用 75%酒精消毒。

二、人員操作
1.保證手部的清洗、消毒:取樣前及做樣前都要先洗手再消毒。
2.取樣要具有代表性(隨機樣、目的樣、綜合樣)且要標示清楚。
3.取樣完畢,不可在車間逗留,要及時將樣品放入超凈臺,對其外表面進行紫外燈照射消毒。
4.在要求的做樣區域進行操作。
5.做樣前,要用 75%酒精棉球對樣品袋口部進行擦拭消毒,再開口。
6.往鹽水瓶加樣品時,要注意勺子或袋子盡量不接觸瓶口。
7.樣品計量要準確,稀釋倍數也要準確(1mL 吸管不允許將管口敲掉),進行 100 倍稀釋時,1mL 吸管要伸入鹽水中,不可以將樣品管壁流下去,同時要避免將管底部捅破。
8.鹽水溫度以 40℃左右為宜,不能過熱,將部分微生物燙死,也不能溫度太低,不能將奶粉溶解*。
9.進行稀釋時,要搖勻,保證溶液的均一性。
10.傾倒平皿時,要注意培養基瓶口不要接觸到平皿;傾倒的培養基要適量,不可以太少,在培養過程中干掉,微生物亦死亡,以 15mL 左右為宜。
11.做大腸菌群樣時,要提前將乳糖膽鹽培養基培養管按需要量備好,放入超凈臺對外表面進行紫外線滅菌。
12.接二步時,要注意先將接種針(環)進行冷卻,避免出現接不上菌落的情況發生,導致無法判斷、確認。
13.做樣完畢,及時放入相應培養箱進行培養,并清理清潔超凈臺。


培養基的滅菌及使用:

1.每次配置時,要注意其日期是否在保質期內,查看其開瓶日期及瓶口密封性,保證其未變質,并且未吸潮。
2.培養基配置時,稱量要準確,包括鹽水的分裝要準確。
3.一定要保證現配制現滅菌,未滅菌的配好培養基不能長時間放置,更不可隔夜。
4.滅菌時要保證恒溫、恒壓,同時要保證有效滅菌時間。
5.滅菌過的培養基要冰箱保存,可保存一周,一般不超過 3 天。而且要遵循“先入先出"原則,先配制的要先使用。
6.在使用時,要根據當班次的使用量,用水浴鍋先將培養基溶化為液態,然后及時調低水域溫度(先化好的可從水域取出,放在水浴鍋鍋蓋上)待用,千萬不可長時間使培養基處于高溫狀態。
7.做產品微生物檢測時,傾倒培養基溫度在 45℃左右,不可過燙,避免將菌燙死;也不可過涼,化好的培養基又結塊凝固,不便于觀察結果。
8.每瓶培養基均要做空白。
9.盡量集中做樣,避免頻繁打開同一瓶培養基瓶塞,增大培養基的污染幾率,出現誤差結果。
10.培養基剩余過少時,可先將其傾倒成空白用板。


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