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技術(shù)文章

大鼠ELISA試劑盒5點樣本收集保存方法

閱讀:1021          發(fā)布時間:2020-9-29

大鼠ELISA試劑盒操作步驟:

1. 從室溫平衡20min 后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。

2. 設(shè)置標準品孔和樣本孔,標準品大鼠ELISA試劑盒孔各加不同濃度的標準品50μL;

3. 待測樣本孔先加生物素10μL,再加待測樣本50μL;

4. 隨后標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5 次(也可用洗板機洗板)。

6. 每孔加入底物A、B 各50μL,37℃避光孵育15min。

7. 每孔加入終止液50μL,15min 內(nèi),在450nm 波長處測定各孔的OD 值。

大鼠ELISA試劑盒樣品收集、處理及保存方法:

1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。

2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。

3. 細胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。

4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。

5. 保存:如果樣本大鼠ELISA試劑盒收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

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