詳細介紹
細胞名稱 人胚胎皮膚成纖維細胞;HES培養
形態特性 成纖維細胞樣
品牌 貼壁生長
特征特性 該細胞系來源于一男性胚胎的皮膚組織。2005年由*昆明細胞庫建立。
培養條件 DMEM-H:
Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 15%NBS
傳代方法 1:
2傳代;3-4天一次
傳代情況 P3
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法(-)
STR -
同工酶
染色體
使用權限 A類
人胚胎皮膚成纖維細胞;HES培養操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復蘇培養 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養液(37℃預熱,8~10倍體積)離心管內,稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養瓶內,在37℃、5%co2及飽和濕度下培養。
1.2.2 細胞傳代 原代培養的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,用0.25%胰酶消化1~2min,將培養瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態特征。
1.4 細胞的計數 常規消化細胞,待細胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數板蓋玻片的一側加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數板四角大方格細胞數,按公式計算出細胞數。細胞數/ml原液=(四方格細胞數之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數生長期的細胞,以0.25%胰酶消化成單細胞懸液,計數后分別接種于12個25cm2培養瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,吸除培養基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化、計數已貼壁細胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數/接種細胞數) ×100%,計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養基。每天隨機取3孔,計數每孔細胞的數目并計算平均值。連續計數10d,繪制細胞生長曲線
人胚胎皮膚成纖維細胞;HES培養貼壁細胞: 對于貼壁細胞應先吸(倒)盡培養基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進行消化,(根據經驗),晃動使消化液鋪均勻置37度培養箱約2-5分鐘,鏡下見細胞收縮變圓或少數脫落后,輕輕振動瓶底使細胞全部脫落,加入2-3ml*培養基后,輕輕吹打,使細胞基本成單個懸浮,然后分置其它無菌培養瓶內,加入*培養基后繼續培養或實驗。
人胚胎皮膚成纖維細胞;HES培養懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養瓶內,加入*培養基繼續培養,如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養基,輕輕吹勻后,分置其它培養瓶內加入*培養基繼續培養。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經過了遺傳改造。
BP(Human Bullous Pemphigoid) ELISA Kit 人大皰性類天皰瘡抗體Multi-class antibodies規格: 48T
Anti-Phospho-Jak1 (Tyr1022/1023) 磷酸化蛋白質酪氨酸激酶JAK-1抗體Multi-class antibodies規格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh LDHC/Cancer,testis antigen 32 乳酸脫氫酶LDH-C(/抗原32)抗體 規格 0.1ml
ET-1(Human Endothelin 1) ELISA Kit 人內皮素1 96T
CAF1p55 英文名稱: 染色質組裝因子1P55抗體 0.2ml
CD8B 英文名稱: CD8β鏈(CD8-β)抗體 0.1ml
Anti-Phospho-Jak1 (Tyr1022/1023) 磷酸化蛋白質酪氨酸激酶JAK-1抗體Multi-class antibodies規格: 0.1ml
VEGF(Human Vascular Endothelial cell Growth Factor) ELISA KIT 人血管內皮細胞生長因子Multi-class antibodies規格: 48T
Anti-Ghrelin 腦腸肽抗體Multi-class antibodies規格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh Mouse Anti-Goat IgG/RBITC 羅丹明標記的小鼠抗羊IgG 規格 0.3ml
Hsp-60(Human Heat Shock Protein 60) ELISA Kit 人熱休克蛋白60 96T
RAMP2 英文名稱: 受體活性修飾蛋白2抗體 0.1ml
phospho-CTNNBIP1 (Thr43+Ser50) 英文名稱: 磷酸化β鏈接素相互作用蛋白1抗體 0.1ml
Anti-Ghrelin 腦腸肽抗體Multi-class antibodies規格: 0.1ml
人尿苷二磷酸葡萄糖神經酰胺葡萄糖基轉移酶(UGCG)ELISA試劑盒人96T0.78-50 ng/mL大鼠催產素受體(OXTR)ELISA試劑盒,英文名:OXTR ELISA KiISA Kit for Human Next to BRCA1 gene 1 protein大鼠可溶性腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體(sTRAIL)ELISA試劑盒,英文名:sTRAIL ELISA Kit人神經細胞生長抑制因子(Necdin)ELISA試劑盒人96T0.312-20 ng/mL大鼠激動異構酶/細胞分裂素MB(CKMB)ELISA試劑盒,英文名:CKMB ELISA KiISA Kit for Human PC4 and SFRS1-interacting protein大鼠谷氨酸脫羧酶自身抗體(GAD-Ab)ELISA試劑盒,英文名:GAD-Ab ELISA Kit人肽基脯氨酰順反異構酶1(PIN1)ELISA試劑盒人96T78-5000 pg/mL大鼠單胺氧化酶(MAO)ELISA試劑盒,英文名:MAO ELISA KiISA Kit for Human Perilipin-1大鼠白介素1可溶性受體Ⅱ(IL-1sRⅡ)ELISA試劑盒,英文名:IL-1sRⅡ ELISA KiISA Kit for Human Prokineticin-1大鼠Ⅰ型膠原交聯羧基末端肽(ⅠCTP)ELISA試劑盒,英文名:ⅠCTP ELISA Kit
大鼠Slit同源物2(Slit2)ELISA試劑盒,英文名:Slit2 ELISA KiISA Kit for Human Mammaglobin-A大鼠胰島素樣生長因子2(IGF2)ELISA試劑盒,英文名:IGF2 ELISA KiISA Kit for Human Solute carrier family 2, facilitated glucose transporter member 3大鼠雙腎上腺皮質激素(DCX)ELISA試劑盒,英文名:DCX ELISA KiISA Kit for Triglyceride大鼠粒細胞巨噬細胞集落激因子(GMCSF)ELISA試劑盒,英文名:GMCSF ELISA KiISA Kit for Human Tumor necrosis factor ligand superfamily member 12大鼠谷氨酸脫氫酶(GDH)ELISA試劑盒,英文名:GDH ELISA KiISA Kit for Human Pantetheinase大鼠別孕烯醇酮(AP)ELISA試劑盒,英文名:AP ELISA Kit大鼠Bcl2/腺病毒E1B相互作用蛋白3(BNIP3)ELISA試劑盒,英文名:BNIP3 ELISA Kit
兔抗雞IgG純化抗體 1mg/10mg 國產
YY1AP1 英文名稱: 肝癌相關蛋白2抗體(轉錄因子YY1結合蛋白1抗體) 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-CPI17 alpha (Thr38) 磷酸化蛋白磷酸激酶PKC/CPI-17抗體 規格 0.1ml
Alpha-HCG(Human chorionic gonadotropin Alpha ) 人α亞基人絨毛膜促性腺激素抗原Multi-class antibodies規格: 0.5mg
DCHS1 英文名稱: 原鈣粘蛋白16抗體 0.2ml
Anti-14-3-3 family protein 蘋果14-3-3蛋白抗體(植物)Multi-class antibodies規格: 1ml
人胚胎皮膚成纖維細胞;HES培養Anti-TNF- Alpha /HRP 辣根過氧化物酶標記鼠抗人壞死因子-α單克隆抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
PLGF (Placenta growth factor) 胎盤生長因子(多肽抗原)Multi-class antibodies規格: 0.5mg
腱糖蛋白-C抗體 anti-Tn-C 0.2ml
5HT1E Receptor 英文名稱: 5-羥色胺受體1E抗體 0.2ml
EMR1 英文名稱: 表皮生長因子樣激素受體1 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-JunB (Thr102/Thr104) 磷酸化活化蛋白激酶B抗體 規格 0.2ml
PLGF (Placenta growth factor) 胎盤生長因子(多肽抗原)Multi-class antibodies規格: 0.5mg