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小鼠外周血中性粒原代細胞
小鼠外周血粒細胞分離自外周血；外周血是除骨髓之外的血液，臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細胞釋放到血液中，再在從血液中提取分離得到造血干細胞，我們把這樣得到的干細胞稱為外周血干細胞，在二十一世紀初人類開始的生命方舟計劃中提出外周血這一新概念。白細胞是一類無色、球形、有核的血細胞。白細胞不是一個均一的細胞群，根據其形態、功能和來源部位可以分為三大類：粒細胞、單核細胞和淋巴細胞，其中粒細胞又可根據胞質中顆粒的染色性質不同，分為粒細胞、嗜酸粒細胞和嗜堿粒細胞三種。粒細胞是在瑞氏（Wright）染色血涂片中，胞質呈無色或極淺的淡紅色，有許多彌散分布的細小的（0.2～0.4微米）淺紅或淺紫色的顆粒。細胞核呈桿狀或2～5分葉狀，葉與葉間有細絲相連。粒細胞具趨化作用、吞噬作用和殺菌作用。粒細胞來源于骨髓，具有分葉形或桿狀的核，胞漿內含有大量既不嗜堿也不嗜酸的細顆粒。這些顆粒多是溶酶體，內含髓過氧化酶、、堿性磷酸酶和酸性水解酶等豐富的酶類，與細胞的吞噬和消化功能有關。粒細胞在血液的非特異性免疫中起著十分重要的作用，它處于機體抵御微生物病原體，特別是在化膿性細菌入侵的第一線，具有很強的吞噬活性，可吞噬細菌、衰老的紅細胞、抗原一抗體復合物和壞死的細胞等。粒細胞內含有大量溶酶體酶，因此能將吞噬入細胞內的細菌和組織碎片分解。當粒細胞吞噬數十個細菌后，自身發生解體，所釋出的各種溶酶體酶類能溶解周圍組織而形成膿液。粒細胞是人體內壽命短的細胞，一般體外培養12-24h內活性穩定，48h活性下降，96h基本死亡。
英文名稱 | Mouse Peripheral Blood Neutrophil Cells | 組織來源 | 外周血 |
產品規格 | 5×10?Cells/T25培養瓶 | 產品貨號 | YS-01X7466 |
細胞形態 | 圓形 | 生長特性 | 貼壁 |
產品名稱：小鼠外周血中性粒細胞
組織來源：外周血
產品規格：5×10?Cells/T25培養瓶
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 懸浮
細胞形態 圓形
傳代特性 不增殖；不傳代
消化液 0.25%
培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
方法簡介
公司實驗室分離的小鼠外周血粒采用取外周血、通過密度梯度離心法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
公司實驗室分離的小鼠外周血粒經瑞氏染色法，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中，T25培養瓶加6-8ml培養基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養基吹勻，將細胞懸液加入培養瓶中，補加適量培養基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
A-427細胞，人肺癌細胞 小鼠成纖維細胞,L929細胞 CM-R103大鼠腦靜脈血管平滑肌細胞培養基100mL | 核孔復合體蛋白88抗體 |
TRAF2和NCK激酶相互作用蛋白抗體 | 嘧啶P450 2R1抗體 |
慢性淋巴細胞白血病缺失基因6蛋白抗體 | 低密度脂蛋白受體的誘導降解蛋白抗體 |
營養因子-3前蛋白抗體 | 淀粉抗體 |
嘧啶細胞核蛋白1抗體 | 甲羥戊酸激酶抗體 |
RM-1(小鼠前列腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 | HT1080 人成纖維肉瘤細胞 |
UM-UC-3人膀胱移行細胞癌 UM-UC-3 human bladder ansitional cell carcinoma MEM培養基(GIBCO)+10%FBS | FIGF Protein Mouse 重組小鼠 VEGF-D / VEGFD / FIGF 蛋白 (Fc 標簽) |
直腸粘膜上皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) | 人肺腺癌細胞;Calu-3 |
小耳豬肺細胞;SEP-L1 | 人晶狀體上皮細胞cDNAHLEpiC cDNA |
非洲綠猴腎細胞系/HCV-NS5B;Vero-HCV-NS5B 人卵巢癌細胞，SK-OV-3[SKOV-3]細胞 BT549(管癌細胞) | 小鼠外周血中性粒原代細胞低密度脂蛋白受體的誘導降解蛋白抗體 |
胰島β細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) | WISH(人羊膜細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠胚胎成纖維細胞;BALB/C 3T3 |
IL1R1 Others Cynomolgus 食蟹猴 IL1R1 人細胞裂解液 (陽性對照) | CM-R021大鼠胰腺上皮細胞培養基100mL |
K562/Adr 人白血病阿耐藥株 | 糖基轉移酶8結構域1抗體 |
鈣激活鉀通道蛋白4抗體 | CM-H130人視網膜微血管內皮細胞培養基100mL |
原鈣粘蛋白β7抗體 | 表皮生長因子抗體 |
酪羥化酶抗體 | RM-1(小鼠前列腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 |
1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養基，培養過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時，棄去培養基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養基終止消化，可使用血球計數板計數。
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