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詳細介紹
本網站銷售的化學產品僅供科學研究或工業應用，不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療！
細胞屬性：
方法簡介
公司實驗室分離的小鼠腎皮質上皮采用-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法，并通過上皮細胞專用培養基培養篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
公司實驗室分離的小鼠腎皮質上皮經PCK免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產品名稱 | 小鼠腎皮質上皮原代細胞 | 組織來源 | 腎組織 |
英文名稱 | Mouse Renal Cortical Epithelial Cells | 貨號 | YS-01X7247 |
產品規格 | 5×10?Cells/T25培養瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
小鼠腎皮質上皮細胞分離自腎組織；腎臟是機體的重要器官，它的基本功能是生成尿液，借以清除體內代謝產物及某些廢物、毒物，同時經重吸收功能保留水份及其他有用物質，如葡萄糖、蛋白質、氨基酸、鈉離子、鉀離子、等，以調節水、電解質平衡及維護酸堿平衡。腎臟同時還有內分泌功能，生成腎素、促紅細胞生成素、活性D3、前列腺素、激肽等，又為機體部分內分泌激素的降解場所和腎外激素的靶器官。腎臟的這些功能，保證了機體內環境的穩定，使新陳代謝得以正常進行。
培養信息：
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 上皮細胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞培養方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中，T25培養瓶加6-8ml培養基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養基吹勻，將細胞懸液加入培養瓶中，補加適量培養基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
公司產品：
軟骨細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) | 干擾素α受體2抗體 |
PDZ結構域PDZK4蛋白抗體 | 肌動蛋白結合蛋白CFL抗體 |
癌基因ETS2抗體 | 肌球蛋白相互作用G蛋白交換因子抗體 |
嘧啶c氧化酶IV亞型1抗體 | Erdj5/DNAJC10蛋白抗體 |
1號染色體開放閱讀框149抗體 | 重組瘤病毒抗體 |
JTB Others Human 人 Jumping anslocation Breakpoi / JTB 人細胞裂解液 (陽性對照) | Promocell C-24305 Melanocyte Growth Medium M2 (prf), 黑色素細胞生長培養基M2型套裝，無酚紅 500ml |
平滑肌細胞培養基SMCM-sf-prf | HDAC3 Others Human 人 HDAC3 / Histone deacetylase 3 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
人小腦星形膠質細胞( Hac) (1×106 ) 小鼠干細胞(EGFP標記) Mouse | TNFRSF10D Others Cynomolgus 食蟹猴 AIL R4 / CD264 / TNFRSF10D 人細胞裂解液 (陽性對照) |
SERPINF2 Others Mouse 小鼠 SerpinF2 人細胞裂解液 (陽性對照) | 293細胞，轉染腺病毒E1A基因的人腎上皮細胞 人肺腺癌細胞,GLC-82細胞 肺癌組織源性原代細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)/1ml |
CM-H065人輸尿管上皮細胞培養基100mL | 小鼠腎皮質上皮原代細胞肌球蛋白相互作用G蛋白交換因子抗體 |
NCI-H209細胞，人小細胞肺癌 人癌抗雌激素耐藥株,LCC9細胞 上皮細胞生長添加物MEpiCGS | 人腦血管平滑肌細胞 |
倉鼠卵巢細胞;Lec1 | CD3D & CD3E Others Cynomolgus 食蟹猴 CD3D & CD3E Heterodimer 人細胞裂解液 (陽性對照) |
JeKo-1(人套細胞淋巴瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴 / 恒河猴 IL12A / NKSF1 人細胞裂解液 (陽性對照) | 分子伴侶復合體TCP-1β抗體 |
電壓門控性鉀通道Kv2.2抗體 | 小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-B4 I型膠原酶(含10mL酶解緩沖液) 1mL |
蛋白BOC抗體 | 核孔蛋白NUP160抗體 |
谷受體1抗體 | JTB Others Human 人 Jumping anslocation Breakpoi / JTB 人細胞裂解液 (陽性對照) |
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中，將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側，以免產生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
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