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小鼠骨原代細(xì)胞

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×10?
貨號(hào) YS-01X7639 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn)    
小鼠骨原代細(xì)胞公司出售的產(chǎn)品:小鼠原代肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞 CAL-27(人舌鱗癌細(xì)胞) ZR-75-30 人導(dǎo)管癌細(xì)胞 1ml/T75 MS1 小鼠胰島內(nèi)皮細(xì)胞 HEL 人紅白血病細(xì)胞 人原代星形膠質(zhì)細(xì)胞

詳細(xì)介紹

本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,不直接用于食品、藥品、臨床或動(dòng)物的診斷或治療!
細(xì)胞屬性:

小鼠骨原代細(xì)胞

方法簡(jiǎn)介

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠骨采用膠原酶消化法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè)

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠骨經(jīng)骨鈣素免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

產(chǎn)品名稱

小鼠骨原代細(xì)胞

組織來源

骨組織

英文名稱

Mouse Osteocyte   Cells

貨號(hào)

YS-01X7639

產(chǎn)品規(guī)格

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

用途

僅供科研實(shí)驗(yàn)

 

小鼠骨原代細(xì)胞
細(xì)胞簡(jiǎn)介:

小鼠骨細(xì)胞分離自骨組織;骨組織的細(xì)胞成分包括骨原細(xì)胞、成骨細(xì)胞、骨細(xì)胞和破骨細(xì)胞。只有骨細(xì)胞存在于骨組織內(nèi),其他三種細(xì)胞均位于骨組織的邊緣。骨細(xì)胞(Osteocyte)是人體骨骼中主要的細(xì)胞成分。在成年人骨骼中,骨細(xì)胞占細(xì)胞總數(shù)量的90%95%,大約是成骨細(xì)胞數(shù)量的20倍。骨細(xì)胞生長(zhǎng)在骨骼內(nèi)部的骨基質(zhì)中。骨細(xì)胞的細(xì)胞體呈梭形或類圓形,位于基質(zhì)構(gòu)成的骨陷窩內(nèi)。與細(xì)胞類似,每個(gè)骨細(xì)胞具有大量向外延伸的突觸,而這些突觸均位于由骨基質(zhì)構(gòu)成的骨小管結(jié)構(gòu)中。通過這些突觸,骨細(xì)胞能夠與骨表面的細(xì)胞、周圍其它的骨細(xì)胞進(jìn)行“交流"。普遍認(rèn)為,骨細(xì)胞起源于成骨細(xì)胞。在骨形成的終末階段,成骨細(xì)胞將可能有3種不同的歸宿:分化成為骨細(xì)胞、轉(zhuǎn)移至骨表面成為暫不活動(dòng)的成骨細(xì)胞、進(jìn)入程序死亡過程(凋亡)。骨細(xì)胞為扁橢圓形多突起的細(xì)胞,核亦扁圓、染色深。胞質(zhì)弱嗜堿性。電鏡下,胞質(zhì)內(nèi)有少量溶酶體、線粒體和粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng),高爾基復(fù)合體亦不發(fā)達(dá)。骨細(xì)胞夾在相鄰兩層骨板間或分散排列于骨板內(nèi)。相鄰骨細(xì)胞的突起之間有縫隙連接。在骨基質(zhì)中,骨細(xì)胞胞體所占據(jù)的橢圓形小腔,稱為骨陷窩,其突起所在的空間稱骨小管。相鄰的骨陷窩借骨小管彼此通連。骨陷窩和骨小管內(nèi)均含有組織液,骨細(xì)胞從中獲得養(yǎng)分。

培養(yǎng)信息:

小鼠骨原代細(xì)胞

培養(yǎng)基 FBS、生長(zhǎng)添加劑、PenicillinStreptomycin

換液頻率 2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 梭形、多角形

傳代特性 屬于終末分化細(xì)胞;屬于不增殖細(xì)胞群

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO25%

小鼠骨原代細(xì)胞

細(xì)胞培養(yǎng)方法:

小鼠骨原代細(xì)胞

1、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;

②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個(gè)瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;

③1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;

④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;

⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。

2、細(xì)胞復(fù)蘇:

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時(shí)間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。

3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)

②1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;

③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細(xì)胞;

④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。

公司產(chǎn)品:小鼠骨原代細(xì)胞

視網(wǎng)膜muller細(xì)胞Many   types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)

細(xì)胞間粘附分子-2抗體

叢蛋白A4抗體

成簇相關(guān)蛋白1抗體

甲精結(jié)合蛋白17抗體

原活化蛋白激酶MAP4K6抗體

1號(hào)染色體開放閱讀框147抗體

多巴胺受體D2抗體

1號(hào)染色體開放閱讀框146抗體

同源盒蛋白HOXA9抗體

CD96 Others Human CD96 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

FOLR1 Others Mouse 小鼠 FOLR1 / FR-alpha 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

人癌細(xì)胞;MDA-MB-453

人淋巴內(nèi)皮細(xì)胞 (HLEC)( 5×105 )

PIGR Others Human PIGR 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

TACSTD2 Others Mouse 小鼠 OP2 / TACSTD2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

PVR Others Rat 大鼠 PVR / CD155 / NECL5 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

HVMF Pellet 人類絨毛間質(zhì)成纖維細(xì)胞團(tuán)塊 > 1 mio.cells 人腦血管平滑肌細(xì)胞裂解物HBVSMCL

CM-M047小鼠腸微血管細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

小鼠骨原代細(xì)胞原活化蛋白激酶MAP4K6抗體

SFTPD Others Mouse 小鼠 SFTPD 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

大耳山羊腎細(xì)胞;LDG-2

CSF2 Protein Mouse 重組小鼠 GM-CSF / CSF2 蛋白 (His 標(biāo)簽)

大額牛與婆羅門牛雜交F1代皮膚成纖維樣細(xì)胞;BOS-6 羊膜細(xì)胞,WISH細(xì)胞   786-O [786-0](腎透明細(xì)胞腺癌細(xì)胞)

CPM Others Mouse 小鼠 Carboxypeptidase M / CPM 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

鉀通道相互作用蛋白3抗體

轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1結(jié)合蛋白1抗體

FZD10 Others Mouse 小鼠 FZD10 / Frizzled-10 / CD350 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

Bcl-10抗體

()關(guān)節(jié)粘連NOG蛋白抗體

顆粒溶素抗體

CD96 Others Human CD96 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

 


操作步驟:

小鼠骨原代細(xì)胞
1.將無(wú)菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中,將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片,待細(xì)胞長(zhǎng)至80%時(shí)取出爬片。

2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。

3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細(xì)胞通透。

4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。

5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。

6. 細(xì)胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。

7. 二抗孵育:選與一抗對(duì)應(yīng)的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。

8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽(yáng)性信號(hào)時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色。

9. 復(fù)染:用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍(lán)。

10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側(cè),再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),以免產(chǎn)生氣泡,封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。

11. 鏡檢觀察。



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