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詳細介紹
小鼠鼻黏膜成纖維原代細胞
小鼠鼻黏膜成纖維細胞分離自鼻黏膜組織；黏膜是覆蓋在機體內消化、呼吸、泌尿、生殖等器官管腔內壁的一層組織結構，由上皮組織和疏松結締組織構成。根據部位不同，有口腔黏膜、胃腸黏膜、鼻腔黏膜、氣管黏膜、陰道黏膜、眼瞼黏膜等不同名稱。它們的結構也因功能、部位不一而不盡相同。鼻腔黏膜，簡稱鼻黏膜，覆蓋于鼻腔表面，黏膜下方為軟骨、骨或骨骼肌。成纖維細胞是結締組織的主要細胞成分，由胚胎時期的間充質細胞分化而來。成纖維細胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構，其細胞核呈規則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛，細胞質嗜弱堿性，具明顯的蛋白質合成和分泌活動，在一定條件下，它可以實現跟纖維細胞的互相轉化；成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的成纖維細胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養基中。30min細胞貼壁，其中部分開始伸出偽足，表現為小的突起；6h后細胞基本貼壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長，不聚集成團；細胞排列緊密，有的交叉重疊生長，平坦、胞體較大，細胞質透明，細胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細胞融合，并彼此連接成網狀；細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。
英文名稱 | Mouse Nasal Mucosal Fibroblast Cells | 組織來源 | 鼻黏膜 |
產品規格 | 5×10?Cells/T25培養瓶 | 產品貨號 | YS-01X8492 |
細胞形態 | 成纖維細胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產品名稱：小鼠鼻黏膜成纖維細胞
組織來源：鼻黏膜
產品規格：5×10?Cells/T25培養瓶
培養基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態：成纖維細胞樣
傳代特性：可傳3代左右
消化液：0.25%
培養條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
小鼠鼻黏膜成纖維細胞體外培養周期有限；建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養，以此保證該細胞的佳培養狀態。
方法簡介
實驗室分離的小鼠鼻黏膜成纖維采用-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法，并通過成纖維細胞專用培養基培養篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
實驗室分離的小鼠鼻黏膜成纖維經Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中，T25培養瓶加6-8ml培養基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養基吹勻，將細胞懸液加入培養瓶中，補加適量培養基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
兔主動脈平滑肌細胞;CCC-SMC-1 | γ干擾素誘導蛋白202抗體 |
前列腺素F2a受體抗體PGF2αR | Centaurin α1抗體 |
FKBP135蛋白抗體 | 雙微體2癌基因抗體 |
畸胎瘤衍化生長因子抗體(C端) | 特異性DMRT3蛋白抗體 |
1號染色體開放閱讀框65抗體 | β氨基己糖苷酶A抗體 |
CHL1 Others Mouse 小鼠 CHL-1 人細胞裂解液 (陽性對照) | Cellgro 25-072-CI Lymphocyte Separation Medium( 100ml |
人成纖維細胞裂解物HMFL | AGO3 Others Human 人 AGO3 / Argonaute 3 / EIF2C3 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
METAP1 Others Human 人 METAP1 人細胞裂解液 (陽性對照) | BCAM Others Human 人 BCAM 人細胞裂解液 (陽性對照) |
LS-174T(人結腸腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 人 PRNP / Prion 人細胞裂解液 (陽性對照) | BGN Others Mouse 小鼠 Biglycan / PG-S1 / BGN 人細胞裂解液 (陽性對照) |
CM-R020大鼠上皮細胞培養基100mL | 小鼠鼻黏膜成纖維原代細胞雙微體2癌基因抗體 |
PRKD2 Others Human 人 PRKD2 / PKD2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) | RSC, 大鼠雪旺細胞 |
人癌細胞;MDA-MB-231 | hMNC-PB single donor Pellet 人類外周血單核細胞團塊單一捐獻者，超 > 1 mio.cells 人羊膜上皮細胞總RNAHAmEpiC NA |
F98大鼠腦膠質瘤細胞 F98 rat glioma cells DMEM+10%FBS | 6號染色體開放閱讀框223抗體 |
Rho的核苷酸交換因子12抗體 | CXCL16 Others Rat 大鼠 CXCL16 / SR-PSOX 人細胞裂解液 (陽性對照) |
乳腺癌相關蛋白2抗體 | 高分子量絲蛋白抗體 |
糖基轉移酶8結構域1抗體 | CHL1 Others Mouse 小鼠 CHL-1 人細胞裂解液 (陽性對照) |
1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養基，培養過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時，棄去培養基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養基終止消化，可使用血球計數板計數。
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