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詳細介紹
本網站銷售的化學產品僅供科學研究或工業應用，不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療！
細胞屬性：
方法簡介
實驗室分離的兔骨骼肌微血管內皮采用膠原酶消化結合差速貼壁法、專用培養基篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
實驗室分離的兔骨骼肌微血管內皮經CD31免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產品名稱 | 兔骨骼肌微血管內皮原代細胞 | 組織來源 | 骨骼肌 |
英文名稱 | Rabbit Skeletal Muscle Microvascular Endothelial Cells | 貨號 | YS-01X8353 |
產品規格 | 5×10?Cells/T25培養瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
兔骨骼肌微血管內皮細胞分離自四肢肌肉組織；骨骼肌又稱橫紋肌，肌肉中的一種，約占全身重量的40%。骨骼肌纖維為長柱形的多核細胞，肌膜的外面有基膜緊密貼附。屬于橫紋肌，橫紋肌還包括心肌與內臟橫紋肌，其中骨骼肌主要分布于四肢。每塊肌肉都是具有一定形態、結構和功能的器官，有豐富的血管、淋巴分布，在軀體支配下收縮或舒張，進行隨意運動。微血管又稱毛細血管。分布于各種組織和細胞間的微細的血管。介于微動脈和微靜脈之間。平均直徑7-9微米，數量極多，成網狀分布。管壁由一層內皮細胞及一薄層基膜組成，厚約0.5微米。基膜外面有薄層結締組織，其中有纖維細胞、巨噬細胞和周細胞等。細的微血管由一個內皮細胞圍成管腔，較粗的微血管由2-3個內皮細胞圍成。分布于肌肉組織、組織和結締組織中的微血管，內皮細胞間為縫隙連接（縫隙寬150埃），稱連續微血管。血管內皮細胞在器官和組織的結構和功能上起著非常重要的作用。并與多種疾病的發生與發展有關。近年來血管內皮細胞在炎癥、休克等一系列病理生理改變中的重要性愈來愈受到人們的重視。研究發現，不同來源的內皮細胞在生物學特征、結構和功能等方面均存在一定差別，而同是微血管內皮細胞，它們又存在器官和組織的特異性。骨骼肌組織是動物體內含量多的組織，肌肉組織供血豐富，是研究內皮細胞功能和血管生成的理想靶組織。
培養信息：
包被條件：PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）
培養基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態：內皮細胞樣
傳代特性：可傳2-3代
消化液：0.25%
培養條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
兔骨骼肌微血管內皮細胞體外培養周期有限；建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養，以此保證該細胞的佳培養狀態。
細胞培養方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中，T25培養瓶加6-8ml培養基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養基吹勻，將細胞懸液加入培養瓶中，補加適量培養基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
公司產品：
小鼠前胃癌細胞;MFC | Anti-Tyk2/Non receptor tyrosine protein kinase 2 非受體酪蛋白激酶2抗體Multi-class antibodies規格： 0.2ml |
CDK5(Human Cyclin Dependent Kinase 5) ELISA Kit 人周期素依賴性激酶5 96T | Anti-HSA/FITC 熒光素標記鼠抗人血清白蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規格： 0.2ml |
Rhesus antibody Rh thrombin II Ⅱ(II)抗體 規格 0.1ml | THP(Human T-H glycoprotein) ELISA Kit 人TH糖蛋白Multi-class antibodies規格： 48T |
HSPABP/HIP/HSC70 Interacting Protein HIP： 熱休克蛋白70相互作用蛋白抗體 0.2ml | Rhesus antibody Rh Catalase 酶抗體 規格 0.1ml |
FOXH1： 叉頭蛋白H1抗體 0.2ml | E2 ELISA Kit 大鼠雌二醇Multi-class antibodies規格： 48T |
CXCL16 Others Canine 狗 CXCL16 / SR-PSOX 人細胞裂解液 (陽性對照) | CA9 Others Human 人 CAIX / CA9 人細胞裂解液 (陽性對照) |
人滑膜細胞總RNAHS NA | EREG Others Mouse 小鼠 EREG / epiregulin 人細胞裂解液 (陽性對照) |
MPC-11(小鼠漿細胞瘤) 5×106cells/瓶×2 BALB/3T3(BALB/C小鼠胚成纖維細胞) | GKN1 Others Human 人 GKN1 / Gasokine 1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
KIT Others Human 人 c-KIT / CD117 人細胞裂解液 (陽性對照) | Romas(人淋巴瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 WI-38(體胚肺細胞) |
Hep-2, 人喉癌細胞系 | 兔骨骼肌微血管內皮原代細胞THP(Human T-H glycoprotein) ELISA Kit 人TH糖蛋白Multi-class antibodies規格： 48T |
CD1d1 Others Mouse 小鼠 CD1D / R3G1 人細胞裂解液 (陽性對照) | 人肝動脈平滑肌細胞培養基 100mL |
Tca-8113(人舌鱗癌細胞) 5×106cells/瓶×2 | L1210小鼠白血病細胞 L1210 mouse leukemia cells DMEM培養基+10%FBS |
IGFBP5 Others Canine 狗 IGFBP5 / IGFBP-5 人細胞裂解液 (陽性對照) | Anti-RAM-11/FITC 熒光素標記抗RAM-11抗體IgGMulti-class antibodies規格： 0.2ml |
2-Oct： 陽離子轉運蛋白2抗體 0.1ml | CD226 Others Mouse 小鼠 DNAM-1 / CD226 人細胞裂解液 (陽性對照) |
SORCS1： 液泡蛋白分選受體SORCS抗體 0.2ml | phospho-CSF2RB (Tyr766)： 0酸化粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子受體β抗體 0.1ml |
Rhesus antibody Rh IgG/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標記的驢抗豚鼠IgG 規格 0.1ml | CXCL16 Others Canine 狗 CXCL16 / SR-PSOX 人細胞裂解液 (陽性對照) |
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中，將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側，以免產生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
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