化工儀器網(wǎng)
詳細(xì)介紹
兔肺動(dòng)脈內(nèi)皮原代細(xì)胞
兔肺動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞分離自肺動(dòng)脈組織；肺動(dòng)脈亦稱肺動(dòng)脈干。在呼吸空氣的脊椎動(dòng)物中，把靜脈血由心臟導(dǎo)向肺臟的動(dòng)脈。肺動(dòng)脈起于右心室，在主動(dòng)脈之前向左上后方斜行。細(xì)胞呈單層多角形鋪路石狀分布；該細(xì)胞在維持血管內(nèi)外的動(dòng)態(tài)平衡、合成和分泌細(xì)胞因子和介質(zhì)、維持凝血和纖溶的動(dòng)態(tài)平衡中起重要作用。肺動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞呈單層多角形鋪路石狀分布，該細(xì)胞在維持血管內(nèi)外的動(dòng)態(tài)平衡、合成和分泌細(xì)胞因子和介質(zhì)、維持凝血和纖溶的動(dòng)態(tài)平衡中起重要作用。
英文名稱 | Rabbit Pulmonary Artery Endothelial Cells | 組織來源 | 肺動(dòng)脈 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X7844 |
細(xì)胞形態(tài) | 內(nèi)皮細(xì)胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱：兔肺動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞
組織來源：肺動(dòng)脈
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
包被條件：PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）
培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：內(nèi)皮細(xì)胞樣
傳代特性：可傳2-3代
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
兔肺動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
方法簡介
實(shí)驗(yàn)室分離的兔肺動(dòng)脈內(nèi)皮采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法、并通過內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
實(shí)驗(yàn)室分離的兔肺動(dòng)脈內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
1、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個(gè)瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時(shí)間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
小鼠樹突狀細(xì)胞肉瘤低轉(zhuǎn)移細(xì)胞(VAP33-GFP融合蛋白穩(wěn)定過表達(dá));DG6-VAP33-GFP | Anti-Phospho-Tuberin/TSC2 (Tyr1571) 0酸化馬鈴薯球蛋白(結(jié)節(jié)性硬化)抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml |
PIPLC(Human phosphoinositide-specific phospholipase C) ELISA Kit 人0酯酰肌醇特異性0酯酶C 96T | Anti-MMP-20/FITC 熒光素標(biāo)記基質(zhì)金屬蛋白酶20抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
Rhesus antibody Rh THSD1 血小板跨膜反應(yīng)蛋白1抗體 規(guī)格 0.2ml | Alpha1-MG(Human Alpha1-microglobulin) ELISA Kit 人α1微球蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 48T |
HOXA4： 同源盒基因HOXA4蛋白抗體 0.1ml | Rhesus antibody Rh Cathepsin B 組織蛋白酶B抗體 規(guī)格 0.1ml |
FOXRED2： FOXRED2蛋白抗體 0.2ml | OT/BGP ELISA Kit 大鼠骨鈣素/骨谷蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 48T |
GP1BB Others Rat 大鼠 GP1BB / CD42c 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | 人胚胎，皮膚，肌肉;M-22 人食管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL |
人間充質(zhì)干細(xì)胞(脂肪)cDNAHMSC-ad cDNA | TNFSF11 Others Human 人 RANKL / OPGL / TNFSF11 / CD254 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
Promocell C-22170 Myocyte GrowthMedium KIT, 心肌細(xì)胞生長培養(yǎng)基套裝 500ml | ART4 Others Mouse 小鼠 Art4 / CD297 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
GDF10 Others Mouse 小鼠 GDF10 / BMP-3B 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | RS1(大鼠皮膚成纖維樣細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 THP-1(人單核細(xì)胞) |
kasumi-1, 人白血病細(xì)胞株 | 兔肺動(dòng)脈內(nèi)皮原代細(xì)胞Alpha1-MG(Human Alpha1-microglobulin) ELISA Kit 人α1微球蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 48T |
CD36 Others Human 人 CD36 / SCARB3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | 人腦靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL |
IGFBP4 Protein Mouse 重組小鼠 IGFBP4 蛋白 (His 標(biāo)簽) | OPM-2-UBC-EGFP(穩(wěn)定株)人骨髓瘤細(xì)胞 OPM-2-UBC-EGFP (stable sain) human myeloma cell 1640+20% FBS(熱滅活) |
SERPINB6 Others Human 人 SerpinB6 / PI-6 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | Anti-Phospho-Rad17 (Ser645) /FITC 熒光素標(biāo)記0酸化細(xì)胞周期檢控Rad17蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
Osterix： 成骨相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子抗體 0.1ml | 293E(人胚腎細(xì)胞(EBNA1基因修飾)) 5×106cells/瓶×2 原代膠質(zhì)細(xì)胞特制基礎(chǔ)培養(yǎng)基Many types of cells包裝：500/250/100ml |
SOX10： 轉(zhuǎn)錄因子SOX10抗體 0.2ml | phospho-c-Abl(Thr735)： 0酸化非受體酪酸激酶c-Abl抗體 0.1ml |
Rhesus antibody Rh IgG/Bio 標(biāo)記的驢抗豚鼠IgG 規(guī)格 0.1ml | GP1BB Others Rat 大鼠 GP1BB / CD42c 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
化工儀器網(wǎng)