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詳細介紹
本網站銷售的化學產品僅供科學研究或工業應用，不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療！
細胞屬性：
方法簡介
實驗室分離的兔鼻黏膜成纖維采用-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法，并通過成纖維細胞專用培養基培養篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
實驗室分離的兔鼻黏膜成纖維經Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產品名稱 | 兔鼻黏膜成纖維原代細胞 | 組織來源 | 鼻黏膜 |
英文名稱 | Rabbit Nasal Mucosal Fibroblast Cells | 貨號 | YS-01X8318 |
產品規格 | 5×10?Cells/T25培養瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
兔鼻黏膜成纖維細胞分離自鼻黏膜組織；黏膜是覆蓋在機體內消化、呼吸、泌尿、生殖等器官管腔內壁的一層組織結構，由上皮組織和疏松結締組織構成。根據部位不同，有口腔黏膜、胃腸黏膜、鼻腔黏膜、氣管黏膜、陰道黏膜、眼瞼黏膜等不同名稱。它們的結構也因功能、部位不一而不盡相同。鼻腔黏膜，簡稱鼻黏膜，覆蓋于鼻腔表面，黏膜下方為軟骨、骨或骨骼肌。成纖維細胞是結締組織的主要細胞成分，由胚胎時期的間充質細胞分化而來。成纖維細胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構，其細胞核呈規則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛，細胞質嗜弱堿性，具明顯的蛋白質合成和分泌活動，在一定條件下，它可以實現跟纖維細胞的互相轉化；成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的成纖維細胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養基中。30min細胞貼壁，其中部分開始伸出偽足，表現為小的突起；6h后細胞基本貼壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長，不聚集成團；細胞排列緊密，有的交叉重疊生長，平坦、胞體較大，細胞質透明，細胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細胞融合，并彼此連接成網狀；細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。
培養信息：
培養基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態：成纖維細胞樣
傳代特性：可傳3代左右
消化液：0.25%
培養條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
兔鼻黏膜成纖維細胞體外培養周期有限；建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養，以此保證該細胞的佳培養狀態。
細胞培養方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中，T25培養瓶加6-8ml培養基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養基吹勻，將細胞懸液加入培養瓶中，補加適量培養基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
公司產品：
CM-R099大鼠表皮黑色素細胞培養基100mL | AQP0： 水通道蛋白0抗體 0.1ml |
Anti-HPV18 E6 人類狀瘤病毒18 E6抗體Multi-class antibodies規格： 0.2ml | Rhesus antibody Rh AANAT 芳香胺N-乙酰化轉移酶抗體 規格 0.2ml |
Anti-CBX3/FITC 熒光素標記染色盒同源物3抗體IgGMulti-class antibodies規格： 0.2ml | Rhesus antibody Rh ICAD/DFF-45 Beta Caspase激活的脫氧核糖核酸酶抑制劑抗體 規格 0.1ml |
Apelin 脂肪炎癥因子Apelin抗原 0.5mg | HIF 2 alpha： 缺氧誘導因子2α /HIF-2α抗體 0.1ml |
IgG/Gold 膠體金標記的羊抗小鼠IgG 0.5ml | Rhesus antibody Rh FAIM1 FAS凋亡抑制分子1抗體 規格 0.2ml |
Saos-2，人成骨肉瘤細胞 | 貓源細胞 |
雜交瘤(B類);Z51B3C10H12A12G2F7B5 小鼠表皮角質形成細胞培養基 100mL | BRL 3A, 大鼠肝正常細胞 Rattus |
大鼠元細胞培養基 100mL | IFNA14 Protein Mouse 重組小鼠 IFNA14 / Ierferon alpha-14 蛋白 (Fc 標簽) |
HBL-100 人整合 SV40基因的上皮細胞 | Calu-6(人肺退行性癌細胞) 5×106cells/瓶×2 |
OK負鼠腎細胞 OK opossum kidney cells MEM培養基(GIBCO)+10%FBS | 兔鼻黏膜成纖維原代細胞Rhesus antibody Rh ICAD/DFF-45 Beta Caspase激活的脫氧核糖核酸酶抑制劑抗體 規格 0.1ml |
VEGFC Protein Rat 重組大鼠 VEGFC / VEGF-C 蛋白 (aa 108-223, His 標簽) | AMTN Others Human 人 AMTN / Amelotin 人細胞裂解液 (陽性對照) |
H9c2細胞，大鼠心肌細胞 人肝癌細胞,HepG2/2-15細胞 CL-0128JeKo-1(人套細胞淋巴瘤細胞)5×106cells/瓶×2 | 人淋巴成纖維細胞HLF |
MN-c, 小鼠皮質元 | Rhesus antibody Rh sIgA/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標記的兔抗人分泌型IgA 規格 0.1ml |
ON(Mouse osteonectin) ELISA Kit 小鼠骨粘連蛋白 96T | 615小鼠網織細胞性白血病瘤株;L615 |
ChRM3 peptide 毒蕈堿型乙酰受體M3抗原Multi-class antibodies規格： 0.5mg | E3(Human Estriol) ELISA Kit 人雌三醇Multi-class antibodies規格： 48T |
Mast Cell Chymase： 肥大細胞類白酶1抗體 0.1ml | Saos-2，人成骨肉瘤細胞 |
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中，將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側，以免產生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
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