詳細介紹
實驗方法步驟:
特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據保守序列設計的專一性引物,與相關病毒無交叉反應。
3. 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應。
4. 一管式熒光定量 PCR 檢測,避免后續污染。
5. 本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應體系的熒光定量 PCR。
6. 本產品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
儲存條件:-20℃以下,有效期12個月。
參數規格:
貨號:YS-01P6408
產品規格:48T 0.2PCR管
產品運輸:低溫運輸
產品保存:-20℃保存
產品有效期:一年
運輸:低溫
注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。
特點優勢:
1. 特異性:所有產品使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析,經過及自建龐大數據庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段,可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現性:該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證,重現性為100%。
3. 靈敏性:該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 序列資源豐富,除公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
6. 該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。
實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環境中進行。設立一個專用的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
4.PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續性。
6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。
1,2-環己二四乙(DCTA) AR,97.0%4-溴-2-甲基噻吩 98%豚鼠腫瘤壞死因子α(TNF-α)免疫試劑盒
反式-1.2-環己二四乙 98%2-乙基噻吩 97%豚鼠孕激(progestogen)免疫試劑盒
二 AR2-羥基-5-硝基吡啶 98%豚鼠乙型肝炎病表面抗原(HBsAg)免疫試劑盒
二 CP2-硫脲嘧啶 98%豚鼠乙型肝炎病表面抗體(HBsAb)免疫試劑盒
二 98%2-硫脲嘧啶 分析標準品豚鼠血清淀粉樣蛋白A(SAA)免疫試劑盒
二乙烯三五乙 CP噻吩-2-羧 99%豚鼠血管緊張Ⅱ(ANG-Ⅱ)免疫試劑盒
2,6-二酚靛鈉鹽 AR2-噻吩乙酰 98%豚鼠纖溶抗纖溶復合物(PAP)免疫試劑盒
N,N-二甲基對二 AR,環保試劑,96%3-噻吩甲 98%豚鼠晚期糖基化終末產物(AGEs)免疫試劑盒
二氨基脲 AR富勒烯C70 99%豚鼠嗜性粒陽離子蛋白(ECP)免疫試劑盒
二氨基脲 ACS富勒烯C70 98%豚鼠生長激(GH)免疫試劑盒
二氨基脲 98%富勒烯C60 99.9%豚鼠腎(Renin)免疫試劑盒
3,5-二 98%富勒烯C70 99%豚鼠神經蛋白聚糖(NCAN)免疫試劑盒
2,6-二溴酚靛酚鈉 AR富勒烯C60 99.9%豚鼠前列腺E2(PGE2)免疫試劑盒
異辛 standard for GC, ≥99.5% (GC)黃色氧化鉛 99.999% metals basis豚鼠皮質(Cortisol)免疫試劑盒
異辛 AR2-氨基-3,4-二甲 98%豚鼠內皮型一氧化氮合成(eNOS)免疫試劑盒
驢源性成分核酸檢測試劑盒48T 0.2PCR管大鼠抗促甲狀腺受體抗體(TRAb)ELISA試劑盒,11-溴-1-十一周期后期促進蛋白亞基11抗體
大鼠心肌營養1(CT-1)ELISA試劑盒,11-溴-1-十一腺瘤性結腸息肉病蛋白2抗體
大鼠脫氧吡啶酚/脫氧吡啶啉(DPD)ELISA試劑盒,3,5-二溴甲磷化分裂周期蛋白16抗體
大鼠骨橋(OPN)ELISA試劑盒,3,5-二溴甲DNA修復相互作用蛋白抗體
大鼠降鈣基因相關肽(CGRP)ELISA試劑盒,4,5-雙(二基膦)-9,9-二甲基氧雜蒽脂肪膜相關蛋白抗體
大鼠S100蛋白(S-100)ELISA試劑盒,4,5-雙(二基膦)-9,9-二甲基氧雜蒽載脂蛋白A1結合蛋白抗體抗體
大鼠過氧化物體增殖因子活化受體γ( PPAR-γ)ELISA試劑盒,4,5-雙(二基膦)-9,9-二甲基氧雜蒽載脂蛋白B-mRNA編輯復合物1抗體
大鼠游離β絨毛膜促性腺激(f-βCG)ELISA試劑盒,4--3-三載脂蛋白B-mRNA編輯復合物2抗體