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小鼠胚胎成纖維細胞;Psi2DAP培養

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更新時間:2018-04-26 14:02:13瀏覽次數:284

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產品簡介

小鼠胚胎成纖維細胞;Psi2DAP培養只能用于科研,不得用于臨床。應用公司細胞庫細胞株種類齊全:大鼠腹水癌細胞、腫瘤細胞、正常細胞、耐藥細胞株。細胞狀態良好,飽滿,光澤度好,*,專業技術指導。歡迎廣大科研用戶!

詳細介紹

小鼠胚胎成纖維細胞;Psi2DAP培養懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養瓶內,加入*培養基繼續培養,如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養基,輕輕吹勻后,分置其它培養瓶內加入*培養基繼續培養。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經過了遺傳改造。
細胞名稱  小鼠胚胎成纖維細胞;Psi2DAP培養
形態特性 成纖維細胞

品牌 貼壁生長

特征特性 這株細胞生成一種可以感染小鼠細胞的載體。 Psi2 DAP細胞生成的載體編碼了人類胎盤堿性磷酸酯酶基因和新霉素抗性基因。 這株細胞通過Psi2細胞插入一個重組的逆轉錄病毒(DAP)基因組衍生而來。 被這種Psi2 DAP產生的載體感染的細胞表達的磷酸酯酶可用組織化學方法檢測,可以用作體內追蹤他們命運的標記。 這些細胞也可能產生輔助病毒。 檢測輔助病毒的方法或其他逆轉錄病毒技術,請參考Cepko, C.L. Lineage analysis and immor
貼壁細胞: 對于貼壁細胞應先吸(倒)盡培養基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進行消化,(根據經驗),晃動使消化液鋪均勻置37度培養箱約2-5分鐘,鏡下見細胞收縮變圓或少數脫落后,輕輕振動瓶底使細胞全部脫落,加入2-3ml*培養基后,輕輕吹打,使細胞基本成單個懸浮,然后分置其它無菌培養瓶內,加入*培養基后繼續培養或實驗。
操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復蘇培養 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養液(37℃預熱,8~10倍體積)離心管內,稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養瓶內,在37℃、5%co2及飽和濕度下培養。
1.2.2 細胞傳代 原代培養的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,用0.25%胰酶消化1~2min,將培養瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態特征。
1.4 細胞的計數 常規消化細胞,待細胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數板蓋玻片的一側加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數板四角大方格細胞數,按公式計算出細胞數。細胞數/ml原液=(四方格細胞數之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數生長期的細胞,以0.25%胰酶消化成單細胞懸液,計數后分別接種于12個25cm2培養瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,吸除培養基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化、計數已貼壁細胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數/接種細胞數) ×100%,計算貼壁率。 
1.6 生長曲線 取指數生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養基。每天隨機取3孔,計數每孔細胞的數目并計算平均值。連續計數10d,繪制細胞生長曲線
Anti-RANK/TNFRSF11A/CD265/FITC 熒光素標記核轉錄因子NF-κB受體抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml

Rabbit Anti-rat IgG/HRP 辣根過氧化物酶標記兔抗大鼠IgGMulti-class antibodies規格: 0.1ml

嗜鉻粒素A抗體 Anti-CGA 0.2ml

Rabbit Anti-horse IgM/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標記的兔抗馬IgM 0.1ml

Fibulin 1 英文名稱: “衰老關鍵蛋白”抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh PKC beta 1/2 蛋白激酶C beta 1/2抗體 規格 0.1ml

Rabbit Anti-rat IgG/HRP 辣根過氧化物酶標記兔抗大鼠IgGMulti-class antibodies規格: 0.1ml
PR(Progestogerone receptor)Human 人孕激素受體Multi-class antibodies規格: 48T

Anti-Claudin 4 緊密連接蛋白4抗體Multi-class antibodies規格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh NOC3L/FAD24 脂肪細胞分化因子24 規格 0.2ml

Human Beta Lactoglobulin, Beta-Lg ELISA Kit 人β乳球蛋白 96T

TUBA1C 英文名稱: 微管相關蛋白α6抗體 0.1ml

C1orf112 英文名稱: 1號染色體開放閱讀框112抗體 0.2ml

Anti-Claudin 4 緊密連接蛋白4抗體Multi-class antibodies規格: 0.2ml

Syntenin 2 英文名稱: 多配體聚糖結合蛋白2抗體 0.2ml

PHC1 英文名稱: 早期發育調控蛋白1抗體 0.2ml

增殖細胞核抗原抗體 Anti-PCNA 0.1ml

Anti-SRG5/SPATA12/FITC 熒光素標記發生相關基因5抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-NF1(Ser2515) 磷酸化1型神經纖維瘤抗體 規格 0.1ml

fgL2 (Fibrinogen-like 2) 凝血酶原酶 (又稱:纖維介素蛋白;前凝血素)Multi-class antibodies規格: 0.5mg
BetaGAL(Human Alpha-galactosidase) ELISA Kit 人β半乳糖苷酶Multi-class antibodies規格: 48T

Anti-NKA 神經激肽A抗體Multi-class antibodies規格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh IL-13Ra1 白細胞介素-13受體a1抗體 規格 0.1ml

BGP/Gehrelin(Mouse brain-gut peptides) ELISA Kit 小鼠腦腸肽 96T

phospho-PARK2(Ser101) 英文名稱: 磷酸化帕金蛋白抗體 0.1ml

Complement C3 英文名稱: 補體C3a過敏毒素抗體 0.1ml

Anti-NKA 神經激肽A抗體Multi-class antibodies規格: 0.2ml

 

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